中国药理学通报
中國藥理學通報
중국약이학통보
CHINESE PHARMACOLOGICAL BULLETIN
2008年
10期
1306-1310
,共5页
承伟%叶兆伟%王佩琪%赵文明%张壮%李智
承偉%葉兆偉%王珮琪%趙文明%張壯%李智
승위%협조위%왕패기%조문명%장장%리지
肺动脉高压%Ryanodine受体%肌浆网%放射配基%平衡解离常数%最大结合容量%基因序列
肺動脈高壓%Ryanodine受體%肌漿網%放射配基%平衡解離常數%最大結閤容量%基因序列
폐동맥고압%Ryanodine수체%기장망%방사배기%평형해리상수%최대결합용량%기인서렬
目的 分析肺动脉高压时肺动脉平滑肌Ryanodine受体(ryanodine receptor,RyR)的结合功能改变及基因序列的变化.方法 梯度离心法提取肺动脉平滑肌肌浆网膜蛋白组分,放射配基结合方法 测定平衡解离常数(Kd)、最大结合容量(Bmax)的变化;体外提取肺动脉平滑肌细胞总RNA,反转录合成RyR2 cDNA,以cDNA为模板使用特异性引物对目的 片段进行PCR扩增,切胶回收后Sanger双脱氧末端终止法测定序列.结果 野百合碱(monocrotaline,MCT)所致肺动脉高压组RyR最大结合容量(Bmax)为(197±21.4)nmol·g-1 protein,较对照组(168±13.7) nmol·g-1 protein明显增加(P<0.01);平衡解离常数(Kd)为(0.276±0.026) nmol·L-1与对照组(0.282±0.031) nmol·L-1相比差异无显著性(P>0.05);野百合组RyR2 C-末端基因序列与对照组无差异.结论 MCT所致肺动脉高压大鼠RyR最大结合容量(Bmax)增加,提示受体的数量发生了上调;Kd无明显变化,说明与受体的亲和力无改变.MCT所致肺动脉高压大鼠2型RyR(RyR2)C-末端基因序列无变化.
目的 分析肺動脈高壓時肺動脈平滑肌Ryanodine受體(ryanodine receptor,RyR)的結閤功能改變及基因序列的變化.方法 梯度離心法提取肺動脈平滑肌肌漿網膜蛋白組分,放射配基結閤方法 測定平衡解離常數(Kd)、最大結閤容量(Bmax)的變化;體外提取肺動脈平滑肌細胞總RNA,反轉錄閤成RyR2 cDNA,以cDNA為模闆使用特異性引物對目的 片段進行PCR擴增,切膠迴收後Sanger雙脫氧末耑終止法測定序列.結果 野百閤堿(monocrotaline,MCT)所緻肺動脈高壓組RyR最大結閤容量(Bmax)為(197±21.4)nmol·g-1 protein,較對照組(168±13.7) nmol·g-1 protein明顯增加(P<0.01);平衡解離常數(Kd)為(0.276±0.026) nmol·L-1與對照組(0.282±0.031) nmol·L-1相比差異無顯著性(P>0.05);野百閤組RyR2 C-末耑基因序列與對照組無差異.結論 MCT所緻肺動脈高壓大鼠RyR最大結閤容量(Bmax)增加,提示受體的數量髮生瞭上調;Kd無明顯變化,說明與受體的親和力無改變.MCT所緻肺動脈高壓大鼠2型RyR(RyR2)C-末耑基因序列無變化.
목적 분석폐동맥고압시폐동맥평활기Ryanodine수체(ryanodine receptor,RyR)적결합공능개변급기인서렬적변화.방법 제도리심법제취폐동맥평활기기장망막단백조분,방사배기결합방법 측정평형해리상수(Kd)、최대결합용량(Bmax)적변화;체외제취폐동맥평활기세포총RNA,반전록합성RyR2 cDNA,이cDNA위모판사용특이성인물대목적 편단진행PCR확증,절효회수후Sanger쌍탈양말단종지법측정서렬.결과 야백합감(monocrotaline,MCT)소치폐동맥고압조RyR최대결합용량(Bmax)위(197±21.4)nmol·g-1 protein,교대조조(168±13.7) nmol·g-1 protein명현증가(P<0.01);평형해리상수(Kd)위(0.276±0.026) nmol·L-1여대조조(0.282±0.031) nmol·L-1상비차이무현저성(P>0.05);야백합조RyR2 C-말단기인서렬여대조조무차이.결론 MCT소치폐동맥고압대서RyR최대결합용량(Bmax)증가,제시수체적수량발생료상조;Kd무명현변화,설명여수체적친화력무개변.MCT소치폐동맥고압대서2형RyR(RyR2)C-말단기인서렬무변화.
