西北农业学报
西北農業學報
서북농업학보
ACTA AGRICULTURAE BOREALI-OCCIDENTALIS SINICA
2009年
3期
147-151
,共5页
倪娜娜%祝建波%张春燕%陈创夫
倪娜娜%祝建波%張春燕%陳創伕
예나나%축건파%장춘연%진창부
苜蓿%转化%农杆菌%融合基因
苜蓿%轉化%農桿菌%融閤基因
목숙%전화%농간균%융합기인
为提高农杆菌介导的苜蓿遗传转化效率,获得转K88ac-STⅡ-LTA2/LTB基因苜蓿植株,以苜蓿下胚轴为外植体,对影响遗传转化的预培养时间、农杆菌菌液浓度、筛选方式等进行研究.结果表明,苜蓿下胚轴预培养3 d,菌液浓度为OD6000.5,筛选剂Kan浓度第一阶段和第二阶段分别为30和50 mg/L ,延迟筛选7 d时转化效率最高.对转基因苜蓿进行PCR和PT-PCR检测,初步证实目的基因已经整合到苜蓿基因组中,转化率达28.4%.
為提高農桿菌介導的苜蓿遺傳轉化效率,穫得轉K88ac-STⅡ-LTA2/LTB基因苜蓿植株,以苜蓿下胚軸為外植體,對影響遺傳轉化的預培養時間、農桿菌菌液濃度、篩選方式等進行研究.結果錶明,苜蓿下胚軸預培養3 d,菌液濃度為OD6000.5,篩選劑Kan濃度第一階段和第二階段分彆為30和50 mg/L ,延遲篩選7 d時轉化效率最高.對轉基因苜蓿進行PCR和PT-PCR檢測,初步證實目的基因已經整閤到苜蓿基因組中,轉化率達28.4%.
위제고농간균개도적목숙유전전화효솔,획득전K88ac-STⅡ-LTA2/LTB기인목숙식주,이목숙하배축위외식체,대영향유전전화적예배양시간、농간균균액농도、사선방식등진행연구.결과표명,목숙하배축예배양3 d,균액농도위OD6000.5,사선제Kan농도제일계단화제이계단분별위30화50 mg/L ,연지사선7 d시전화효솔최고.대전기인목숙진행PCR화PT-PCR검측,초보증실목적기인이경정합도목숙기인조중,전화솔체28.4%.