江苏农业学报
江囌農業學報
강소농업학보
JIANGSU JOURNAL OF AGRICULTURAL SCIENCES
2010年
4期
790-795
,共6页
马成英%侯喜林%刘同坤%李俊星%张蜀宁%李英
馬成英%侯喜林%劉同坤%李俊星%張蜀寧%李英
마성영%후희림%류동곤%리준성%장촉저%리영
不结球白菜%抗坏血酸过氧化物酶基因%克隆%原核表达
不結毬白菜%抗壞血痠過氧化物酶基因%剋隆%原覈錶達
불결구백채%항배혈산과양화물매기인%극륭%원핵표체
参照拟南芥APX基因保守域序列设计引物,扩增出不结球白菜抗坏血酸过氧化物酶(APX)基因的核心片段,结合RACE技术获得该基因的5'端序列和3'端序列,利用DNAman软件经序列拼接获得1个全长为1 089bp的cDNA序列,该序列包括开放阅读框867 bp,编码288个氨基酸,蛋白质等电点5.52的相对分子量31 600.APX基因编码的氨基酸序列与拟南芥APX基因编码的氨基酸的同源性为81%.将APX基因片段连接到原核表达载体PGEX-4T-3,转化大肠杆菌BL21(DE3)后诱导重组蛋白质的表达,SDS-PAGE电泳结果表明,产生了预期大小的重组蛋白.
參照擬南芥APX基因保守域序列設計引物,擴增齣不結毬白菜抗壞血痠過氧化物酶(APX)基因的覈心片段,結閤RACE技術穫得該基因的5'耑序列和3'耑序列,利用DNAman軟件經序列拼接穫得1箇全長為1 089bp的cDNA序列,該序列包括開放閱讀框867 bp,編碼288箇氨基痠,蛋白質等電點5.52的相對分子量31 600.APX基因編碼的氨基痠序列與擬南芥APX基因編碼的氨基痠的同源性為81%.將APX基因片段連接到原覈錶達載體PGEX-4T-3,轉化大腸桿菌BL21(DE3)後誘導重組蛋白質的錶達,SDS-PAGE電泳結果錶明,產生瞭預期大小的重組蛋白.
삼조의남개APX기인보수역서렬설계인물,확증출불결구백채항배혈산과양화물매(APX)기인적핵심편단,결합RACE기술획득해기인적5'단서렬화3'단서렬,이용DNAman연건경서렬병접획득1개전장위1 089bp적cDNA서렬,해서렬포괄개방열독광867 bp,편마288개안기산,단백질등전점5.52적상대분자량31 600.APX기인편마적안기산서렬여의남개APX기인편마적안기산적동원성위81%.장APX기인편단련접도원핵표체재체PGEX-4T-3,전화대장간균BL21(DE3)후유도중조단백질적표체,SDS-PAGE전영결과표명,산생료예기대소적중조단백.
