医学研究杂志
醫學研究雜誌
의학연구잡지
JOURNAL OF MEDICAL RESEARCH
2012年
3期
36-41
,共6页
组织蛋白酶B%肝星状细胞%肝纤维化
組織蛋白酶B%肝星狀細胞%肝纖維化
조직단백매B%간성상세포%간섬유화
目的 观察组织蛋白酶B在肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC - T6)中的表达并探讨其在肝纤维化过程中的意义.方法 向HSC - T6细胞中加入组织蛋白酶B抑制剂(Z-FA - FMK),作用12、24、36、48h后,用倒置显微镜分别观察各时间点细胞生长状态的差异并拍照.分别提取Z - FA - FMK作用前后12、24、36、48h的蛋白和RNA,用Western blotting法检测各时间点组织蛋白酶B( cathepsin B)和α- SMA的表达量,用反转录定量PCR( RT - PCR)方法测定各时间点cathepsin B mRNA、TGF-β mRNA和α- SMA mRNA的表达.统计学处理采用配对t检验和Pearson直线相关分析.结果 显微镜观察Z- FA - FMK作用后细胞的增殖分化作用减慢.Western blotting结果显示,对照组和抑制剂组中cathepsin B的表达量随时间的延长而增加,抑制剂组cathepsin B的表达量(0.49±0.04)较对照组(0.68±0.09)有所减少,差异具有统计学意义(t=-6.31,P＜0.05)；α-SMA表达量的变化与cathepsin B的变化平行,抑制剂组α- SMA表达量(0.64±0.03)较对照组(0.79±0.01)有所减少,差异具有统计学意义(t=-6.18,P＜0.05).RT - PCR结果显示抑制剂组cathepsin B mRNA表达量(2.00±0.11)较对照组(2.24±0.47)减少,差异均具有统计学意义(t=-3.41,P＜0.05)；抑制剂组α- SMA mRNA的表达量(0.40±0.06)较对照组(0.81±0.08)减少,差异具有统计学意义(t=-4.28,P＜0.05)；抑制剂组TGF - βmRNA的表达量(1.43±0.16)较对照组(1.81±0.21)减少,差异均具有统计学意义(t=6.44,P＜0.05).结论 组织蛋白酶B可抑制HSC的增殖和转分化,同时可降低肝纤维化指标如TGF -β和α- SMA的表达量,因此,组织蛋白酶B可作为今后治疗肝纤维化的治疗靶点.
目的 觀察組織蛋白酶B在肝星狀細胞(hepatic stellate cell,HSC - T6)中的錶達併探討其在肝纖維化過程中的意義.方法 嚮HSC - T6細胞中加入組織蛋白酶B抑製劑(Z-FA - FMK),作用12、24、36、48h後,用倒置顯微鏡分彆觀察各時間點細胞生長狀態的差異併拍照.分彆提取Z - FA - FMK作用前後12、24、36、48h的蛋白和RNA,用Western blotting法檢測各時間點組織蛋白酶B( cathepsin B)和α- SMA的錶達量,用反轉錄定量PCR( RT - PCR)方法測定各時間點cathepsin B mRNA、TGF-β mRNA和α- SMA mRNA的錶達.統計學處理採用配對t檢驗和Pearson直線相關分析.結果 顯微鏡觀察Z- FA - FMK作用後細胞的增殖分化作用減慢.Western blotting結果顯示,對照組和抑製劑組中cathepsin B的錶達量隨時間的延長而增加,抑製劑組cathepsin B的錶達量(0.49±0.04)較對照組(0.68±0.09)有所減少,差異具有統計學意義(t=-6.31,P＜0.05)；α-SMA錶達量的變化與cathepsin B的變化平行,抑製劑組α- SMA錶達量(0.64±0.03)較對照組(0.79±0.01)有所減少,差異具有統計學意義(t=-6.18,P＜0.05).RT - PCR結果顯示抑製劑組cathepsin B mRNA錶達量(2.00±0.11)較對照組(2.24±0.47)減少,差異均具有統計學意義(t=-3.41,P＜0.05)；抑製劑組α- SMA mRNA的錶達量(0.40±0.06)較對照組(0.81±0.08)減少,差異具有統計學意義(t=-4.28,P＜0.05)；抑製劑組TGF - βmRNA的錶達量(1.43±0.16)較對照組(1.81±0.21)減少,差異均具有統計學意義(t=6.44,P＜0.05).結論 組織蛋白酶B可抑製HSC的增殖和轉分化,同時可降低肝纖維化指標如TGF -β和α- SMA的錶達量,因此,組織蛋白酶B可作為今後治療肝纖維化的治療靶點.
목적 관찰조직단백매B재간성상세포(hepatic stellate cell,HSC - T6)중적표체병탐토기재간섬유화과정중적의의.방법 향HSC - T6세포중가입조직단백매B억제제(Z-FA - FMK),작용12、24、36、48h후,용도치현미경분별관찰각시간점세포생장상태적차이병박조.분별제취Z - FA - FMK작용전후12、24、36、48h적단백화RNA,용Western blotting법검측각시간점조직단백매B( cathepsin B)화α- SMA적표체량,용반전록정량PCR( RT - PCR)방법측정각시간점cathepsin B mRNA、TGF-β mRNA화α- SMA mRNA적표체.통계학처리채용배대t검험화Pearson직선상관분석.결과 현미경관찰Z- FA - FMK작용후세포적증식분화작용감만.Western blotting결과현시,대조조화억제제조중cathepsin B적표체량수시간적연장이증가,억제제조cathepsin B적표체량(0.49±0.04)교대조조(0.68±0.09)유소감소,차이구유통계학의의(t=-6.31,P＜0.05)；α-SMA표체량적변화여cathepsin B적변화평행,억제제조α- SMA표체량(0.64±0.03)교대조조(0.79±0.01)유소감소,차이구유통계학의의(t=-6.18,P＜0.05).RT - PCR결과현시억제제조cathepsin B mRNA표체량(2.00±0.11)교대조조(2.24±0.47)감소,차이균구유통계학의의(t=-3.41,P＜0.05)；억제제조α- SMA mRNA적표체량(0.40±0.06)교대조조(0.81±0.08)감소,차이구유통계학의의(t=-4.28,P＜0.05)；억제제조TGF - βmRNA적표체량(1.43±0.16)교대조조(1.81±0.21)감소,차이균구유통계학의의(t=6.44,P＜0.05).결론 조직단백매B가억제HSC적증식화전분화,동시가강저간섬유화지표여TGF -β화α- SMA적표체량,인차,조직단백매B가작위금후치료간섬유화적치료파점.
