国际遗传学杂志
國際遺傳學雜誌
국제유전학잡지
INTERNATIONAL JOURNAL OF GENETICS
2007年
2期
88-91,161
,共5页
江晖%白静%史忠诚%傅松滨
江暉%白靜%史忠誠%傅鬆濱
강휘%백정%사충성%부송빈
P16%融合蛋白%细胞周期
P16%融閤蛋白%細胞週期
P16%융합단백%세포주기
目的 在原核细胞中表达P16蛋白并纯化,研究外源性P16蛋白对肿瘤细胞周期的影响.方法 构建外源性P16融合蛋白的原核表达载体pQE31-p16.IPTG诱导大肠杆菌BL21菌株表达P16融合蛋白,通过亲和层析柱纯化目的 蛋白,经Western-blot鉴定后,将P16蛋白转导入人肺腺癌细胞系A549中,利用免疫细胞化学方法对蛋白进行细胞内定位,同时绘制细胞生长曲线,并用流式细胞仪分析细胞周期的变化.结果 所构建P16融合蛋自的原核表达载体pQE31-p16,可在大肠杆菌中稳定表达,通过纯化获得P16融合蛋白.利用lipofectamine TM2000转染试剂可将P16蛋白转入A549细胞中,生长曲线与流式细胞术结果显示P16蛋白可抑制肿瘤细胞增殖.结论 原核细胞表达的P16蛋白经纯化,转导进入A549细胞,可影响其生长周期,抑制A549细胞的增殖.
目的 在原覈細胞中錶達P16蛋白併純化,研究外源性P16蛋白對腫瘤細胞週期的影響.方法 構建外源性P16融閤蛋白的原覈錶達載體pQE31-p16.IPTG誘導大腸桿菌BL21菌株錶達P16融閤蛋白,通過親和層析柱純化目的 蛋白,經Western-blot鑒定後,將P16蛋白轉導入人肺腺癌細胞繫A549中,利用免疫細胞化學方法對蛋白進行細胞內定位,同時繪製細胞生長麯線,併用流式細胞儀分析細胞週期的變化.結果 所構建P16融閤蛋自的原覈錶達載體pQE31-p16,可在大腸桿菌中穩定錶達,通過純化穫得P16融閤蛋白.利用lipofectamine TM2000轉染試劑可將P16蛋白轉入A549細胞中,生長麯線與流式細胞術結果顯示P16蛋白可抑製腫瘤細胞增殖.結論 原覈細胞錶達的P16蛋白經純化,轉導進入A549細胞,可影響其生長週期,抑製A549細胞的增殖.
목적 재원핵세포중표체P16단백병순화,연구외원성P16단백대종류세포주기적영향.방법 구건외원성P16융합단백적원핵표체재체pQE31-p16.IPTG유도대장간균BL21균주표체P16융합단백,통과친화층석주순화목적 단백,경Western-blot감정후,장P16단백전도입인폐선암세포계A549중,이용면역세포화학방법대단백진행세포내정위,동시회제세포생장곡선,병용류식세포의분석세포주기적변화.결과 소구건P16융합단자적원핵표체재체pQE31-p16,가재대장간균중은정표체,통과순화획득P16융합단백.이용lipofectamine TM2000전염시제가장P16단백전입A549세포중,생장곡선여류식세포술결과현시P16단백가억제종류세포증식.결론 원핵세포표체적P16단백경순화,전도진입A549세포,가영향기생장주기,억제A549세포적증식.
