中华外科杂志
中華外科雜誌
중화외과잡지
CHINESE JOURNAL OF SURGERY
2004年
9期
554-558
,共5页
刘承利%窦科峰%臧晓霞%朱帮福%陈苏民
劉承利%竇科峰%臧曉霞%硃幫福%陳囌民
류승리%두과봉%장효하%주방복%진소민
癌症疫苗%癌,肝细胞%细胞毒素类%刺激剂
癌癥疫苗%癌,肝細胞%細胞毒素類%刺激劑
암증역묘%암,간세포%세포독소류%자격제
目的研究转4-1BBL基因小鼠肝癌细胞疫苗体外诱导淋巴细胞特异性杀伤活性及刺激同系小鼠脾细胞产生细胞因子(IL-2、TNF-α和GM-CSF)的能力.方法采用脂质体介导法将真核表达质粒pCDNA3.1(+)-m4-1BBL导入小鼠肝癌细胞Hepa1-6,经G418筛选后获得稳定高表达克隆,以丝裂霉素C(MMC)处理后,制成肿瘤细胞疫苗(TCV),经体外与同系小鼠脾淋巴细胞共同培养后,测定淋巴细胞特异性杀伤活性及对脾细胞产生细胞因子(IL-2、TNF-α和GM-CSF)的影响.结果转染4-1BBL的Hepa1-6细胞能够高表达4-1BBL蛋白,并且经MMC处理后制成的瘤苗在培养48 h仍能表达m4-1BBL.与野生型的Hepa1-6细胞相比,上述瘤苗能诱导淋巴细胞产生针对亲本的小鼠肝癌细胞Hepa1-6的特异性杀伤作用(P<0.05),但是对于小鼠肝癌细胞H22及成纤维细胞NIH3T3无效;此瘤苗在体外能显著增强脾细胞分泌细胞因子IL-2、TNF-α和GM-CSF的能力.结论转4-1BBL基因小鼠肝癌细胞疫苗能诱导有效的抗肝癌免疫反应.
目的研究轉4-1BBL基因小鼠肝癌細胞疫苗體外誘導淋巴細胞特異性殺傷活性及刺激同繫小鼠脾細胞產生細胞因子(IL-2、TNF-α和GM-CSF)的能力.方法採用脂質體介導法將真覈錶達質粒pCDNA3.1(+)-m4-1BBL導入小鼠肝癌細胞Hepa1-6,經G418篩選後穫得穩定高錶達剋隆,以絲裂黴素C(MMC)處理後,製成腫瘤細胞疫苗(TCV),經體外與同繫小鼠脾淋巴細胞共同培養後,測定淋巴細胞特異性殺傷活性及對脾細胞產生細胞因子(IL-2、TNF-α和GM-CSF)的影響.結果轉染4-1BBL的Hepa1-6細胞能夠高錶達4-1BBL蛋白,併且經MMC處理後製成的瘤苗在培養48 h仍能錶達m4-1BBL.與野生型的Hepa1-6細胞相比,上述瘤苗能誘導淋巴細胞產生針對親本的小鼠肝癌細胞Hepa1-6的特異性殺傷作用(P<0.05),但是對于小鼠肝癌細胞H22及成纖維細胞NIH3T3無效;此瘤苗在體外能顯著增彊脾細胞分泌細胞因子IL-2、TNF-α和GM-CSF的能力.結論轉4-1BBL基因小鼠肝癌細胞疫苗能誘導有效的抗肝癌免疫反應.
목적연구전4-1BBL기인소서간암세포역묘체외유도림파세포특이성살상활성급자격동계소서비세포산생세포인자(IL-2、TNF-α화GM-CSF)적능력.방법채용지질체개도법장진핵표체질립pCDNA3.1(+)-m4-1BBL도입소서간암세포Hepa1-6,경G418사선후획득은정고표체극륭,이사렬매소C(MMC)처리후,제성종류세포역묘(TCV),경체외여동계소서비림파세포공동배양후,측정림파세포특이성살상활성급대비세포산생세포인자(IL-2、TNF-α화GM-CSF)적영향.결과전염4-1BBL적Hepa1-6세포능구고표체4-1BBL단백,병차경MMC처리후제성적류묘재배양48 h잉능표체m4-1BBL.여야생형적Hepa1-6세포상비,상술류묘능유도림파세포산생침대친본적소서간암세포Hepa1-6적특이성살상작용(P<0.05),단시대우소서간암세포H22급성섬유세포NIH3T3무효;차류묘재체외능현저증강비세포분비세포인자IL-2、TNF-α화GM-CSF적능력.결론전4-1BBL기인소서간암세포역묘능유도유효적항간암면역반응.