N-酰基高丝氨酸内酯降解酶的抗体制备与鉴定
N-선기고사안산내지강해매적항체제비여감정
Prepration and identification of antibodies against N-acyl homoserine lactones degrading enzyme
  • 万方数据
    江苏农业学报 강소농업학보
    JIANGSU JOURNAL OF AGRICULTURAL SCIENCES
    2011年 2期 276-281 ,共6页

    杨雪%谷春艳%牛毅%李婷%胡白石%钱国良%刘凤权%范加勤

    양설%곡춘염%우의%리정%호백석%전국량%류봉권%범가근

    aiiA%attM%AHLs解酯酶%蛋白表达%蛋白免疫 aiiA%attM%AHLs解酯酶%蛋白錶達%蛋白免疫
    aiiA%attM%AHLs해지매%단백표체%단백면역
    根据已报道的aiiA基因及attM基因序列设计引物,分别从蜡质芽孢杆菌(Bacillus cereus)和土壤根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)中PCR扩增获得aiiA基因及attM基因,构建蛋白表达载体pET30a-aiiA及pET30a-attM,在大肠杆菌BL21中诱导表达.利用AiiA解酯酶蛋白和AttM解酯酶蛋白在SDS-PAGE中对应的产物直接成兔免疫,提取血清进行ELISA和Western Blot检测.SDS-PAGE检测发现aiiA基因及attM基因能高效表达AiiA解酯酶蛋白和AttM解酯酶蛋白.ELISA检测结果表明,抗体含量高,稀释106倍依然为有效值.Western Blot 检测结果表明抗体可特异性结合目的蛋白.应用检测结果表明抗体血清能检测到N-酰基高丝氨酸内酯降解酶相关基因的产物,在验证群体感应和群体淬灭等方面将具有应用价值.
    근거이보도적aiiA기인급attM기인서렬설계인물,분별종사질아포간균(Bacillus cereus)화토양근암농간균(Agrobacterium tumefaciens)중PCR확증획득aiiA기인급attM기인,구건단백표체재체pET30a-aiiA급pET30a-attM,재대장간균BL21중유도표체.이용AiiA해지매단백화AttM해지매단백재SDS-PAGE중대응적산물직접성토면역,제취혈청진행ELISA화Western Blot검측.SDS-PAGE검측발현aiiA기인급attM기인능고효표체AiiA해지매단백화AttM해지매단백.ELISA검측결과표명,항체함량고,희석106배의연위유효치.Western Blot 검측결과표명항체가특이성결합목적단백.응용검측결과표명항체혈청능검측도N-선기고사안산내지강해매상관기인적산물,재험증군체감응화군체쉬멸등방면장구유응용개치.
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