CAJ | 학술논문

目的:以家兔痛阈和反应时改变以及即刻早期基因c-fos在脊髓的表达验证家兔佐剂性关节炎作为疼痛模型的可靠性.方法:实验于2003-10/2004-05在南京军区福州总医院动物实验科完成.选用30只日本大耳白兔,随机分为6组,生理盐水2组,佐剂注射2组,佐剂注射后加吗啡2组,每组5只.皮内注射生理盐水7 d,21 d组作对照;皮内注射完全福氏佐剂后7 d组,21 d组及皮内注射完全福氏佐剂后7 d,21 d加用吗啡组.①各组兔的痛阈强度测定:将电流调至刚能引起家兔足趾回缩反应的强度,连测3次,间隔5 min/次,取其平均值,即为基础痛阈强度.②各组兔的反应时测定:将基础痛阈强度按3次/s连续刺激引起兔明显撤腿反应的时间为反应时,连测3次,间隔5 min/次,取平均值.③应用免疫组化等技术测定c-fos和观察关节组织病理变化:各组兔于检测指标后当天,吗啡治疗组于吗啡注射后30 min采集标本,脊髓灌注固定后切片.④进行各指标间相关性分析.结果:30只家兔均纳入结果分析.①家兔痛阈强度和反应时的变化:佐剂7 d组与盐水7 d组相比,痛阈明显下降[(3.00±0.57),(4.46±0.31)V,P＜0.05],反应时明显缩短[(15.92±1.57),(7.48±0.81)ms,P＜0.01],其值明显低于其他各组.②家兔脊髓c-fos阳性反应神经元表达的变化:佐剂7d组双侧脊髓背角有大量c-fos阳性表达,积分吸光度明显高于对照组和其他各组(P＜0.05或0.01).③关节组织的病理变化:家兔右足跖注射佐剂后10 h,右距小腿关节明显红肿,持续1周仍较明显.注射佐剂后7 d光镜下右距小腿关节滑膜组织中大量中性粒细胞、单核细胞浸润.注射佐剂后21 d,滑膜细胞下纤维素大量渗出,甚至出现纤维素样坏死,滑膜脂肪垫组织水肿,炎细胞浸润.④各指标相关性分析:脊髓c-Fos蛋白阳性表达与痛阈、反应时呈显著负相关(r1=-0.695,r2=-0.780,P＜0.01).结论:皮内注射完全福氏佐剂可诱导家兔佐剂性关节炎.从急性期到慢性期,模型的疼痛逐渐减轻,脊髓c-fos在关节炎急性期表达最明显,慢性期有所减少,但仍较正常时表达增多;应用吗啡止痛治疗后,脊髓c-Fos蛋白表达明显减少.此结果进一步证明家兔疼痛模型的成立并且有客观可靠性. 目的:以傢兔痛閾和反應時改變以及即刻早期基因c-fos在脊髓的錶達驗證傢兔佐劑性關節炎作為疼痛模型的可靠性.方法:實驗于2003-10/2004-05在南京軍區福州總醫院動物實驗科完成.選用30隻日本大耳白兔,隨機分為6組,生理鹽水2組,佐劑註射2組,佐劑註射後加嗎啡2組,每組5隻.皮內註射生理鹽水7 d,21 d組作對照;皮內註射完全福氏佐劑後7 d組,21 d組及皮內註射完全福氏佐劑後7 d,21 d加用嗎啡組.①各組兔的痛閾彊度測定:將電流調至剛能引起傢兔足趾迴縮反應的彊度,連測3次,間隔5 min/次,取其平均值,即為基礎痛閾彊度.②各組兔的反應時測定:將基礎痛閾彊度按3次/s連續刺激引起兔明顯撤腿反應的時間為反應時,連測3次,間隔5 min/次,取平均值.③應用免疫組化等技術測定c-fos和觀察關節組織病理變化:各組兔于檢測指標後噹天,嗎啡治療組于嗎啡註射後30 min採集標本,脊髓灌註固定後切片.④進行各指標間相關性分析.結果:30隻傢兔均納入結果分析.①傢兔痛閾彊度和反應時的變化:佐劑7 d組與鹽水7 d組相比,痛閾明顯下降[(3.00±0.57),(4.46±0.31)V,P＜0.05],反應時明顯縮短[(15.92±1.57),(7.48±0.81)ms,P＜0.01],其值明顯低于其他各組.②傢兔脊髓c-fos暘性反應神經元錶達的變化:佐劑7d組雙側脊髓揹角有大量c-fos暘性錶達,積分吸光度明顯高于對照組和其他各組(P＜0.05或0.01).③關節組織的病理變化:傢兔右足蹠註射佐劑後10 h,右距小腿關節明顯紅腫,持續1週仍較明顯.註射佐劑後7 d光鏡下右距小腿關節滑膜組織中大量中性粒細胞、單覈細胞浸潤.註射佐劑後21 d,滑膜細胞下纖維素大量滲齣,甚至齣現纖維素樣壞死,滑膜脂肪墊組織水腫,炎細胞浸潤.④各指標相關性分析:脊髓c-Fos蛋白暘性錶達與痛閾、反應時呈顯著負相關(r1=-0.695,r2=-0.780,P＜0.01).結論:皮內註射完全福氏佐劑可誘導傢兔佐劑性關節炎.從急性期到慢性期,模型的疼痛逐漸減輕,脊髓c-fos在關節炎急性期錶達最明顯,慢性期有所減少,但仍較正常時錶達增多;應用嗎啡止痛治療後,脊髓c-Fos蛋白錶達明顯減少.此結果進一步證明傢兔疼痛模型的成立併且有客觀可靠性.
목적:이가토통역화반응시개변이급즉각조기기인c-fos재척수적표체험증가토좌제성관절염작위동통모형적가고성.방법:실험우2003-10/2004-05재남경군구복주총의원동물실험과완성.선용30지일본대이백토,수궤분위6조,생리염수2조,좌제주사2조,좌제주사후가마배2조,매조5지.피내주사생리염수7 d,21 d조작대조;피내주사완전복씨좌제후7 d조,21 d조급피내주사완전복씨좌제후7 d,21 d가용마배조.①각조토적통역강도측정:장전류조지강능인기가토족지회축반응적강도,련측3차,간격5 min/차,취기평균치,즉위기출통역강도.②각조토적반응시측정:장기출통역강도안3차/s련속자격인기토명현철퇴반응적시간위반응시,련측3차,간격5 min/차,취평균치.③응용면역조화등기술측정c-fos화관찰관절조직병리변화:각조토우검측지표후당천,마배치료조우마배주사후30 min채집표본,척수관주고정후절편.④진행각지표간상관성분석.결과:30지가토균납입결과분석.①가토통역강도화반응시적변화:좌제7 d조여염수7 d조상비,통역명현하강[(3.00±0.57),(4.46±0.31)V,P＜0.05],반응시명현축단[(15.92±1.57),(7.48±0.81)ms,P＜0.01],기치명현저우기타각조.②가토척수c-fos양성반응신경원표체적변화:좌제7d조쌍측척수배각유대량c-fos양성표체,적분흡광도명현고우대조조화기타각조(P＜0.05혹0.01).③관절조직적병리변화:가토우족척주사좌제후10 h,우거소퇴관절명현홍종,지속1주잉교명현.주사좌제후7 d광경하우거소퇴관절활막조직중대량중성립세포、단핵세포침윤.주사좌제후21 d,활막세포하섬유소대량삼출,심지출현섬유소양배사,활막지방점조직수종,염세포침윤.④각지표상관성분석:척수c-Fos단백양성표체여통역、반응시정현저부상관(r1=-0.695,r2=-0.780,P＜0.01).결론:피내주사완전복씨좌제가유도가토좌제성관절염.종급성기도만성기,모형적동통축점감경,척수c-fos재관절염급성기표체최명현,만성기유소감소,단잉교정상시표체증다;응용마배지통치료후,척수c-Fos단백표체명현감소.차결과진일보증명가토동통모형적성립병차유객관가고성.