CAJ | 학술논문

为研究豚鼠精子获能过程中蛋白酪氨酸磷酸化的变化规律,将豚鼠精子悬浮于改良的TALP获能培养基中,在5% CO2 孵箱37 ℃培养,以精子与金霉素(CTC) 荧光结合类型为指标评价精子获能状态,用免疫荧光技术和Western blot方法检测酪氨酸磷酸化的蛋白在精子上的分布以及酪氨酸磷酸化水平的变化.结果显示,随着获能的进行,发生蛋白酪氨酸磷酸化的精子占总精子的百分比增加,由未获能前的36%增至获能7h时的92%.酪氨酸磷酸化的蛋白分布变广,由精子头部扩增至精子头部、鞭毛主段和中段.另外,有80,45,40kDa的三种蛋白发生酪氨酸磷酸化,其中40kDa的蛋白酪氨酸磷酸化水平自精子体外培养后呈递增趋势,45kDa的蛋白酪氨酸磷酸化自培养3h后发现并呈递增趋势,而80kDa的蛋白酪氨酸磷酸化水平在精子培养3h时最高,后呈递减趋势.
위연구돈서정자획능과정중단백락안산린산화적변화규률,장돈서정자현부우개량적TALP획능배양기중,재5% CO2 부상37 ℃배양,이정자여금매소(CTC) 형광결합류형위지표평개정자획능상태,용면역형광기술화Western blot방법검측락안산린산화적단백재정자상적분포이급락안산린산화수평적변화.결과현시,수착획능적진행,발생단백락안산린산화적정자점총정자적백분비증가,유미획능전적36%증지획능7h시적92%.락안산린산화적단백분포변엄,유정자두부확증지정자두부、편모주단화중단.령외,유80,45,40kDa적삼충단백발생락안산린산화,기중40kDa적단백락안산린산화수평자정자체외배양후정체증추세,45kDa적단백락안산린산화자배양3h후발현병정체증추세,이80kDa적단백락안산린산화수평재정자배양3h시최고,후정체감추세.