解剖学报
解剖學報
해부학보
ACTA ANATOMICA SINICA
2008年
5期
688-692
,共5页
姜华军%张春%朱忠华%刘建社%邓安国
薑華軍%張春%硃忠華%劉建社%鄧安國
강화군%장춘%주충화%류건사%산안국
CD2相关蛋白%足细胞%肾小管上皮细胞%系膜细胞%免疫荧光%激光共焦显微镜
CD2相關蛋白%足細胞%腎小管上皮細胞%繫膜細胞%免疫熒光%激光共焦顯微鏡
CD2상관단백%족세포%신소관상피세포%계막세포%면역형광%격광공초현미경
目的 观察CD2相关蛋白(cD2AP)在肾脏不同细胞系中的表达分布,及其与足细胞裂孔隔膜分子nephrin和细胞骨架蛋白F-actin之间的联系.方法 以DMEM培养基培养人肾小球系膜细胞(HMC)和人肾小管上皮细胞系(HK-2),RPMI 1640培养基培养条件永生化小鼠足细胞系.以RT-PCR及Western blotting方法检测足细胞内CD2AP和nephrin的表达.间接免疫荧光结合激光共焦方法观察CD2AP在HMC、HK-2、未分化及已分化足细胞中的表达情况,及CD2AP与nephtin在足细胞中的共存.直接免疫荧光结合激光共焦方法观察F-actin在足细胞的表达及其与CD2AP的共存.结果 CD2AP均匀分布于HK-2及未分化足细胞的核周及胞浆,而不表达于HMC细胞.在足细胞分化过程中,CD2AP的分布发生了变化,出现向周边聚集的现象.CD2AP与足细胞裂孔隔膜分子nephrin及细胞骨架蛋白F-actin在足细胞中存在共定位关系.结论 CD2AP表达于上皮来源的肾脏固有细胞.CD2AP在足细胞中的分布特点,提示CD2AP可能参与足细胞的分化过程,并与裂孔隔膜分子功能及细胞骨架凋节有关.
目的 觀察CD2相關蛋白(cD2AP)在腎髒不同細胞繫中的錶達分佈,及其與足細胞裂孔隔膜分子nephrin和細胞骨架蛋白F-actin之間的聯繫.方法 以DMEM培養基培養人腎小毬繫膜細胞(HMC)和人腎小管上皮細胞繫(HK-2),RPMI 1640培養基培養條件永生化小鼠足細胞繫.以RT-PCR及Western blotting方法檢測足細胞內CD2AP和nephrin的錶達.間接免疫熒光結閤激光共焦方法觀察CD2AP在HMC、HK-2、未分化及已分化足細胞中的錶達情況,及CD2AP與nephtin在足細胞中的共存.直接免疫熒光結閤激光共焦方法觀察F-actin在足細胞的錶達及其與CD2AP的共存.結果 CD2AP均勻分佈于HK-2及未分化足細胞的覈週及胞漿,而不錶達于HMC細胞.在足細胞分化過程中,CD2AP的分佈髮生瞭變化,齣現嚮週邊聚集的現象.CD2AP與足細胞裂孔隔膜分子nephrin及細胞骨架蛋白F-actin在足細胞中存在共定位關繫.結論 CD2AP錶達于上皮來源的腎髒固有細胞.CD2AP在足細胞中的分佈特點,提示CD2AP可能參與足細胞的分化過程,併與裂孔隔膜分子功能及細胞骨架凋節有關.
목적 관찰CD2상관단백(cD2AP)재신장불동세포계중적표체분포,급기여족세포렬공격막분자nephrin화세포골가단백F-actin지간적련계.방법 이DMEM배양기배양인신소구계막세포(HMC)화인신소관상피세포계(HK-2),RPMI 1640배양기배양조건영생화소서족세포계.이RT-PCR급Western blotting방법검측족세포내CD2AP화nephrin적표체.간접면역형광결합격광공초방법관찰CD2AP재HMC、HK-2、미분화급이분화족세포중적표체정황,급CD2AP여nephtin재족세포중적공존.직접면역형광결합격광공초방법관찰F-actin재족세포적표체급기여CD2AP적공존.결과 CD2AP균균분포우HK-2급미분화족세포적핵주급포장,이불표체우HMC세포.재족세포분화과정중,CD2AP적분포발생료변화,출현향주변취집적현상.CD2AP여족세포렬공격막분자nephrin급세포골가단백F-actin재족세포중존재공정위관계.결론 CD2AP표체우상피래원적신장고유세포.CD2AP재족세포중적분포특점,제시CD2AP가능삼여족세포적분화과정,병여렬공격막분자공능급세포골가조절유관.
