江苏农业学报
江囌農業學報
강소농업학보
JIANGSU JOURNAL OF AGRICULTURAL SCIENCES
2009年
2期
296-300
,共5页
李永亮%田美娜%卢曾军%杨苏珍%付元芳%曹轶梅%刘在新
李永亮%田美娜%盧曾軍%楊囌珍%付元芳%曹軼梅%劉在新
리영량%전미나%로증군%양소진%부원방%조질매%류재신
口蹄疫病毒%非结构蛋白%3B蛋白%单克隆抗体
口蹄疫病毒%非結構蛋白%3B蛋白%單剋隆抗體
구제역병독%비결구단백%3B단백%단극륭항체
用E.coli原核表达并纯化的口蹄疫病毒(Foot-and-mouth disease virus, FMDV)非结构蛋白3B免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0进行融合,间接ELISA筛选出分泌鼠IgG的杂交瘤细胞株,将该杂交瘤细胞注射小鼠产生的腹水,用间接ELISA法筛选获得6株能稳定分泌抗3B蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为3E5、4B1、4D7、4E11、7B2、8B11.鉴定结果显示,4B1和4E11细胞分泌IgG1,其余4株细胞分泌IgG2b;纯化后6株腹水单抗的纯度达90%以上,对3B蛋白的ELISA滴度均可达到1:100 000以上;6株单抗均不与FMDV结构蛋白VP1和3D非结构蛋白发生反应;间接免疫荧光试验证明所制备的单抗能够识别3B蛋白;杂交瘤细胞株连续培养3个月以及冻存6个月后复苏,细胞生长良好,杂交瘤细胞分泌的抗体效价稳定.
用E.coli原覈錶達併純化的口蹄疫病毒(Foot-and-mouth disease virus, FMDV)非結構蛋白3B免疫BALB/c小鼠,取其脾細胞與小鼠骨髓瘤細胞SP2/0進行融閤,間接ELISA篩選齣分泌鼠IgG的雜交瘤細胞株,將該雜交瘤細胞註射小鼠產生的腹水,用間接ELISA法篩選穫得6株能穩定分泌抗3B蛋白單剋隆抗體的雜交瘤細胞株,分彆命名為3E5、4B1、4D7、4E11、7B2、8B11.鑒定結果顯示,4B1和4E11細胞分泌IgG1,其餘4株細胞分泌IgG2b;純化後6株腹水單抗的純度達90%以上,對3B蛋白的ELISA滴度均可達到1:100 000以上;6株單抗均不與FMDV結構蛋白VP1和3D非結構蛋白髮生反應;間接免疫熒光試驗證明所製備的單抗能夠識彆3B蛋白;雜交瘤細胞株連續培養3箇月以及凍存6箇月後複囌,細胞生長良好,雜交瘤細胞分泌的抗體效價穩定.
용E.coli원핵표체병순화적구제역병독(Foot-and-mouth disease virus, FMDV)비결구단백3B면역BALB/c소서,취기비세포여소서골수류세포SP2/0진행융합,간접ELISA사선출분비서IgG적잡교류세포주,장해잡교류세포주사소서산생적복수,용간접ELISA법사선획득6주능은정분비항3B단백단극륭항체적잡교류세포주,분별명명위3E5、4B1、4D7、4E11、7B2、8B11.감정결과현시,4B1화4E11세포분비IgG1,기여4주세포분비IgG2b;순화후6주복수단항적순도체90%이상,대3B단백적ELISA적도균가체도1:100 000이상;6주단항균불여FMDV결구단백VP1화3D비결구단백발생반응;간접면역형광시험증명소제비적단항능구식별3B단백;잡교류세포주련속배양3개월이급동존6개월후복소,세포생장량호,잡교류세포분비적항체효개은정.
