现代肿瘤医学
現代腫瘤醫學
현대종류의학
JOURNAL OF MODERN ONCOLOGY
2010年
7期
1259-1263
,共5页
郝建峰%夏禾爱%田敏%张秀敏
郝建峰%夏禾愛%田敏%張秀敏
학건봉%하화애%전민%장수민
PHA-CD3AK细胞%体外诱导%生物学特性
PHA-CD3AK細胞%體外誘導%生物學特性
PHA-CD3AK세포%체외유도%생물학특성
目的:研究PHA-CD3AK细胞的体外诱导方法及其生物学特性,并与LAK细胞进行比较.方法:分离人外周血单个核细胞(PBMC),采用植物血凝素(PHA)、单克隆抗体(anti-CD3McAb)和基因重组人白细胞介素2(rhIL-2)、共同诱导制备PHA-CD3AK细胞;应用流式法分析PHA-CD3AK细胞的免疫表型、乳酸脱氢酶法(LDH)检测PHA-CD3AK细胞的杀伤活性,并观察其形态;吉姆萨染色法观察其核型.结果:微量anti-CD3McAb(0.05μg/ml)辅以少量rhIL-2(300U/ml)和PHA(100μg/ml)共同培养,即能诱导和大量扩增PHA-CD3AK细胞,其扩增倍数显著高于LAK细胞,维持高扩增的时间也远较LAK细胞持久;当效靶细胞比为80:1时,PHA-CD3AK细胞对体外肿瘤细胞(K562)杀伤的百分率为56.5%;免疫表型检测PHA-CDB AK细胞中CD3+、CD4+、CD8+细胞的比率分别为(86.5±5.89)%、(38.20±5.27)%、(42.63±3.50)%;核型为正常二倍体,染色体数目为46条.结论:PHA-CD3AK细胞是以CD3+、CD4+、CD8+细胞为主的异质细胞群,并具有淋巴母细胞样特征,PHA-CD3AK细胞为正常二倍体细胞.PHA-CD3AK细胞是易于体外诱导、扩增能力强,体外存活时间长、杀瘤活性高的一种具有广阔应用前景的肿瘤过继免疫效应细胞.
目的:研究PHA-CD3AK細胞的體外誘導方法及其生物學特性,併與LAK細胞進行比較.方法:分離人外週血單箇覈細胞(PBMC),採用植物血凝素(PHA)、單剋隆抗體(anti-CD3McAb)和基因重組人白細胞介素2(rhIL-2)、共同誘導製備PHA-CD3AK細胞;應用流式法分析PHA-CD3AK細胞的免疫錶型、乳痠脫氫酶法(LDH)檢測PHA-CD3AK細胞的殺傷活性,併觀察其形態;吉姆薩染色法觀察其覈型.結果:微量anti-CD3McAb(0.05μg/ml)輔以少量rhIL-2(300U/ml)和PHA(100μg/ml)共同培養,即能誘導和大量擴增PHA-CD3AK細胞,其擴增倍數顯著高于LAK細胞,維持高擴增的時間也遠較LAK細胞持久;噹效靶細胞比為80:1時,PHA-CD3AK細胞對體外腫瘤細胞(K562)殺傷的百分率為56.5%;免疫錶型檢測PHA-CDB AK細胞中CD3+、CD4+、CD8+細胞的比率分彆為(86.5±5.89)%、(38.20±5.27)%、(42.63±3.50)%;覈型為正常二倍體,染色體數目為46條.結論:PHA-CD3AK細胞是以CD3+、CD4+、CD8+細胞為主的異質細胞群,併具有淋巴母細胞樣特徵,PHA-CD3AK細胞為正常二倍體細胞.PHA-CD3AK細胞是易于體外誘導、擴增能力彊,體外存活時間長、殺瘤活性高的一種具有廣闊應用前景的腫瘤過繼免疫效應細胞.
목적:연구PHA-CD3AK세포적체외유도방법급기생물학특성,병여LAK세포진행비교.방법:분리인외주혈단개핵세포(PBMC),채용식물혈응소(PHA)、단극륭항체(anti-CD3McAb)화기인중조인백세포개소2(rhIL-2)、공동유도제비PHA-CD3AK세포;응용류식법분석PHA-CD3AK세포적면역표형、유산탈경매법(LDH)검측PHA-CD3AK세포적살상활성,병관찰기형태;길모살염색법관찰기핵형.결과:미량anti-CD3McAb(0.05μg/ml)보이소량rhIL-2(300U/ml)화PHA(100μg/ml)공동배양,즉능유도화대량확증PHA-CD3AK세포,기확증배수현저고우LAK세포,유지고확증적시간야원교LAK세포지구;당효파세포비위80:1시,PHA-CD3AK세포대체외종류세포(K562)살상적백분솔위56.5%;면역표형검측PHA-CDB AK세포중CD3+、CD4+、CD8+세포적비솔분별위(86.5±5.89)%、(38.20±5.27)%、(42.63±3.50)%;핵형위정상이배체,염색체수목위46조.결론:PHA-CD3AK세포시이CD3+、CD4+、CD8+세포위주적이질세포군,병구유림파모세포양특정,PHA-CD3AK세포위정상이배체세포.PHA-CD3AK세포시역우체외유도、확증능력강,체외존활시간장、살류활성고적일충구유엄활응용전경적종류과계면역효응세포.