山东畜牧兽医
山東畜牧獸醫
산동축목수의
SHANDONG JOURNAL OF ANIMAL HUSBANDRY AND VETERINARY SCIENCE
2010年
5期
3-4
,共2页
汪运舟%陈维云%王慧%李俊娴%于婷%王树迎
汪運舟%陳維雲%王慧%李俊嫻%于婷%王樹迎
왕운주%진유운%왕혜%리준한%우정%왕수영
荧光定量PCR%反转录%反应体系优化%熔解曲线
熒光定量PCR%反轉錄%反應體繫優化%鎔解麯線
형광정량PCR%반전록%반응체계우화%용해곡선
本研究通过系统对比试验,优化建立了检测山羊卵巢组织中褪黑素受体基因表达量差异的荧光定量PCR技术体系,在这种体系下检测褪黑素受体1A基因在山羊卵巢组织中的差异表达量,可以得到最优的标准曲线,使起始模板浓度与循环数有良好的线性关系,且扩增效率百分数Eff接近1;荧光动力学曲线符合标准的"S"形荧光增长曲线,曲线拐点清楚,基线平而无明显上扬趋势;熔解曲线成单峰,充分说明扩增的特异性高,产物单一,与SYBR Green I荧光染料结合的为目标DNA片段,荧光曲线能够准确反映目的产物的扩增结果.
本研究通過繫統對比試驗,優化建立瞭檢測山羊卵巢組織中褪黑素受體基因錶達量差異的熒光定量PCR技術體繫,在這種體繫下檢測褪黑素受體1A基因在山羊卵巢組織中的差異錶達量,可以得到最優的標準麯線,使起始模闆濃度與循環數有良好的線性關繫,且擴增效率百分數Eff接近1;熒光動力學麯線符閤標準的"S"形熒光增長麯線,麯線枴點清楚,基線平而無明顯上颺趨勢;鎔解麯線成單峰,充分說明擴增的特異性高,產物單一,與SYBR Green I熒光染料結閤的為目標DNA片段,熒光麯線能夠準確反映目的產物的擴增結果.
본연구통과계통대비시험,우화건립료검측산양란소조직중퇴흑소수체기인표체량차이적형광정량PCR기술체계,재저충체계하검측퇴흑소수체1A기인재산양란소조직중적차이표체량,가이득도최우적표준곡선,사기시모판농도여순배수유량호적선성관계,차확증효솔백분수Eff접근1;형광동역학곡선부합표준적"S"형형광증장곡선,곡선괴점청초,기선평이무명현상양추세;용해곡선성단봉,충분설명확증적특이성고,산물단일,여SYBR Green I형광염료결합적위목표DNA편단,형광곡선능구준학반영목적산물적확증결과.
