经济林研究
經濟林研究
경제림연구
ECONOMIC FOREST RESEARCHES
2011年
4期
6-12
,共7页
孙丰宾%魏继承%刘瀛%张妍%马丽丽%付扬威%刘雪梅
孫豐賓%魏繼承%劉瀛%張妍%馬麗麗%付颺威%劉雪梅
손봉빈%위계승%류영%장연%마려려%부양위%류설매
白桦%钙调蛋白%单性花%qRT-PCR%转录表达
白樺%鈣調蛋白%單性花%qRT-PCR%轉錄錶達
백화%개조단백%단성화%qRT-PCR%전록표체
钙调蛋白(CaM)是生物细胞内的重要调控蛋白,参与调节细胞内一系列酶的活性及各项生命活动.应用RACE和RT-PCR技术克隆了白桦的钙调蛋白基因CaM的全长cDNA,该基因长631 bp,开放阅读框(ORF)为450 bp,编码149个氨基酸,预测编码蛋白的相对分子质量为16.85 kDa,理论等电点为4.11,经过对其推测的氨基酸序列进行功能结构域预测,具备CaM典型的EFh结构域,将该基因命名为BpCaM.多序列比对与系统进化树分析结果显示,该基因序列同其它植物的CaM序列相似性均在97%以上.以白桦actin基因作为内参基因,利用定量PCR技术分析BpCaM基因在各发育时期的表达情况,结果表明,BpCaM基因在营养器官的表达高于花器官,幼嫩的组织要高于成熟组织,白桦BpCaM基因在各个器官组织均有表达,但表达量有差异.另外,对白桦雄花突变体进行了转录表达分析,结果显示在雌花、幼茎和幼叶中BpCaM基因在突变植株中上调表达,说明BpCaM基因参与多种组织的发育.
鈣調蛋白(CaM)是生物細胞內的重要調控蛋白,參與調節細胞內一繫列酶的活性及各項生命活動.應用RACE和RT-PCR技術剋隆瞭白樺的鈣調蛋白基因CaM的全長cDNA,該基因長631 bp,開放閱讀框(ORF)為450 bp,編碼149箇氨基痠,預測編碼蛋白的相對分子質量為16.85 kDa,理論等電點為4.11,經過對其推測的氨基痠序列進行功能結構域預測,具備CaM典型的EFh結構域,將該基因命名為BpCaM.多序列比對與繫統進化樹分析結果顯示,該基因序列同其它植物的CaM序列相似性均在97%以上.以白樺actin基因作為內參基因,利用定量PCR技術分析BpCaM基因在各髮育時期的錶達情況,結果錶明,BpCaM基因在營養器官的錶達高于花器官,幼嫩的組織要高于成熟組織,白樺BpCaM基因在各箇器官組織均有錶達,但錶達量有差異.另外,對白樺雄花突變體進行瞭轉錄錶達分析,結果顯示在雌花、幼莖和幼葉中BpCaM基因在突變植株中上調錶達,說明BpCaM基因參與多種組織的髮育.
개조단백(CaM)시생물세포내적중요조공단백,삼여조절세포내일계렬매적활성급각항생명활동.응용RACE화RT-PCR기술극륭료백화적개조단백기인CaM적전장cDNA,해기인장631 bp,개방열독광(ORF)위450 bp,편마149개안기산,예측편마단백적상대분자질량위16.85 kDa,이론등전점위4.11,경과대기추측적안기산서렬진행공능결구역예측,구비CaM전형적EFh결구역,장해기인명명위BpCaM.다서렬비대여계통진화수분석결과현시,해기인서렬동기타식물적CaM서렬상사성균재97%이상.이백화actin기인작위내삼기인,이용정량PCR기술분석BpCaM기인재각발육시기적표체정황,결과표명,BpCaM기인재영양기관적표체고우화기관,유눈적조직요고우성숙조직,백화BpCaM기인재각개기관조직균유표체,단표체량유차이.령외,대백화웅화돌변체진행료전록표체분석,결과현시재자화、유경화유협중BpCaM기인재돌변식주중상조표체,설명BpCaM기인삼여다충조직적발육.