中国组织工程研究
中國組織工程研究
중국조직공정연구
Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research
2012年
10期
1808-1812
,共5页
孙昊%王旭东%代杰文%卢境婷%沈国芳
孫昊%王旭東%代傑文%盧境婷%瀋國芳
손호%왕욱동%대걸문%로경정%침국방
成骨细胞分化%Dlx2%基因%稳定过表达%细胞凋亡%细胞周期
成骨細胞分化%Dlx2%基因%穩定過錶達%細胞凋亡%細胞週期
성골세포분화%Dlx2%기인%은정과표체%세포조망%세포주기
背景:Dlx2 基因在颅神经嵴细胞迁徙进入第一鳃弓过程和颅颌面骨骼发育中起重要作用,但Dlx2 基因对成骨细胞分化过程中细胞凋亡和细胞周期调控的影响尚未见报道.目的:观察Dlx2 基因过表达对前成骨细胞系MC3T3-E1 成骨分化过程中细胞凋亡和细胞周期调控的影响.方法:构建反转录病毒pMSCV-puro-Dlx2 并转染矿化诱导液培养下的MC3T3-E1 细胞,构建稳定过表达Dlx2 基因的细胞系MC3T3-E1-Dlx2.RT-PCR 和Western blot 验证Dlx2 基因过表达细胞系的建立.Annexin V/PI 双染色后流式细胞分选检测细胞凋亡,PI/RNase 双染色后流式细胞分选检测细胞周期变化.结果与结论:实验成功构建稳定过表达Dlx2 基因的细胞系MC3T3-E1-Dlx2.发现Dlx2 基因过表达促进细胞凋亡(P < 0.05),同时阻滞细胞周期于G1/G0 期(P < 0.05),减低细胞增殖性,促进细胞分化行使功能.
揹景:Dlx2 基因在顱神經嵴細胞遷徙進入第一鰓弓過程和顱頜麵骨骼髮育中起重要作用,但Dlx2 基因對成骨細胞分化過程中細胞凋亡和細胞週期調控的影響尚未見報道.目的:觀察Dlx2 基因過錶達對前成骨細胞繫MC3T3-E1 成骨分化過程中細胞凋亡和細胞週期調控的影響.方法:構建反轉錄病毒pMSCV-puro-Dlx2 併轉染礦化誘導液培養下的MC3T3-E1 細胞,構建穩定過錶達Dlx2 基因的細胞繫MC3T3-E1-Dlx2.RT-PCR 和Western blot 驗證Dlx2 基因過錶達細胞繫的建立.Annexin V/PI 雙染色後流式細胞分選檢測細胞凋亡,PI/RNase 雙染色後流式細胞分選檢測細胞週期變化.結果與結論:實驗成功構建穩定過錶達Dlx2 基因的細胞繫MC3T3-E1-Dlx2.髮現Dlx2 基因過錶達促進細胞凋亡(P < 0.05),同時阻滯細胞週期于G1/G0 期(P < 0.05),減低細胞增殖性,促進細胞分化行使功能.
배경:Dlx2 기인재로신경척세포천사진입제일새궁과정화로합면골격발육중기중요작용,단Dlx2 기인대성골세포분화과정중세포조망화세포주기조공적영향상미견보도.목적:관찰Dlx2 기인과표체대전성골세포계MC3T3-E1 성골분화과정중세포조망화세포주기조공적영향.방법:구건반전록병독pMSCV-puro-Dlx2 병전염광화유도액배양하적MC3T3-E1 세포,구건은정과표체Dlx2 기인적세포계MC3T3-E1-Dlx2.RT-PCR 화Western blot 험증Dlx2 기인과표체세포계적건립.Annexin V/PI 쌍염색후류식세포분선검측세포조망,PI/RNase 쌍염색후류식세포분선검측세포주기변화.결과여결론:실험성공구건은정과표체Dlx2 기인적세포계MC3T3-E1-Dlx2.발현Dlx2 기인과표체촉진세포조망(P < 0.05),동시조체세포주기우G1/G0 기(P < 0.05),감저세포증식성,촉진세포분화행사공능.
