吉林农业大学学报
吉林農業大學學報
길임농업대학학보
JOURNAL OF JILIN AGRICUL TURAL UNIVERSITY
2011年
4期
439-442
,共4页
曲英敏%李艳艳%李景梅%王春凤
麯英敏%李豔豔%李景梅%王春鳳
곡영민%리염염%리경매%왕춘봉
脑膜炎奈瑟氏菌%NspA基因%乳酸菌表达载体%原核表达
腦膜炎奈瑟氏菌%NspA基因%乳痠菌錶達載體%原覈錶達
뇌막염내슬씨균%NspA기인%유산균표체재체%원핵표체
用Nco Ⅰ和Kpn Ⅰ双酶切克隆质粒pMD-18T-NspA及可以在乳酸菌与大肠杆菌之间穿梭表达的载体质粒pW425et，将NspA基因与pW425et表达载体用T4DNA连接酶相连，构建出重组质粒pW425et-NspA，将其转入至E.coli DH5α感受态细胞中，筛选阳性重组子进行SDS-PAGE和Western-blot检测，经蛋白电泳可见约18 kD的融合蛋白，Western-blot分析表明该蛋白具有与脑膜炎奈瑟氏菌抗体的反应原性。
用Nco Ⅰ和Kpn Ⅰ雙酶切剋隆質粒pMD-18T-NspA及可以在乳痠菌與大腸桿菌之間穿梭錶達的載體質粒pW425et，將NspA基因與pW425et錶達載體用T4DNA連接酶相連，構建齣重組質粒pW425et-NspA，將其轉入至E.coli DH5α感受態細胞中，篩選暘性重組子進行SDS-PAGE和Western-blot檢測，經蛋白電泳可見約18 kD的融閤蛋白，Western-blot分析錶明該蛋白具有與腦膜炎奈瑟氏菌抗體的反應原性。
용Nco Ⅰ화Kpn Ⅰ쌍매절극륭질립pMD-18T-NspA급가이재유산균여대장간균지간천사표체적재체질립pW425et，장NspA기인여pW425et표체재체용T4DNA련접매상련，구건출중조질립pW425et-NspA，장기전입지E.coli DH5α감수태세포중，사선양성중조자진행SDS-PAGE화Western-blot검측，경단백전영가견약18 kD적융합단백，Western-blot분석표명해단백구유여뇌막염내슬씨균항체적반응원성。
