中国病原生物学杂志
中國病原生物學雜誌
중국병원생물학잡지
JOURNAL OF PATHOGEN BIOLOGY
2007年
2期
93-96
,共4页
人类乳头瘤病毒16型%E7C基因%耻垢分枝杆菌%基因表达
人類乳頭瘤病毒16型%E7C基因%恥垢分枝桿菌%基因錶達
인류유두류병독16형%E7C기인%치구분지간균%기인표체
目的 在耻垢分枝杆菌Mycobaterium smegmatis mc2155中表达人类乳头瘤病毒16型E7C亚基因,为其重组BCG疫苗的研究奠定基础.方法 采用电穿孔转化法将重组质粒pBCG-E7C导入耻垢分枝杆菌(M. smegmatis mc2155)中,通过卡那霉素抗性筛选经PCR鉴定的重组M. smegmatis mc2155,培养于middlebrook7H9 broth(M7H9)培养基中,并添加10%M7H9 enrichment ADC和0.05%Tween 80,37 ℃培养48 h～72 h,42 ℃诱导表达5 h,表达产物进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)及Western blot分析.结果 成功构建pBCG3000-E7C质粒,SDS-PAGE显示表达产物的分子质量单位约为6.5 ku,与预期理论值相符,Western blot分析表达产物能被宫颈癌患者血清识别.结论人类乳头瘤病毒16型E7C基因在M. smegmatis mc2155中成功表达.
目的 在恥垢分枝桿菌Mycobaterium smegmatis mc2155中錶達人類乳頭瘤病毒16型E7C亞基因,為其重組BCG疫苗的研究奠定基礎.方法 採用電穿孔轉化法將重組質粒pBCG-E7C導入恥垢分枝桿菌(M. smegmatis mc2155)中,通過卡那黴素抗性篩選經PCR鑒定的重組M. smegmatis mc2155,培養于middlebrook7H9 broth(M7H9)培養基中,併添加10%M7H9 enrichment ADC和0.05%Tween 80,37 ℃培養48 h～72 h,42 ℃誘導錶達5 h,錶達產物進行十二烷基硫痠鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)及Western blot分析.結果 成功構建pBCG3000-E7C質粒,SDS-PAGE顯示錶達產物的分子質量單位約為6.5 ku,與預期理論值相符,Western blot分析錶達產物能被宮頸癌患者血清識彆.結論人類乳頭瘤病毒16型E7C基因在M. smegmatis mc2155中成功錶達.
목적 재치구분지간균Mycobaterium smegmatis mc2155중표체인류유두류병독16형E7C아기인,위기중조BCG역묘적연구전정기출.방법 채용전천공전화법장중조질립pBCG-E7C도입치구분지간균(M. smegmatis mc2155)중,통과잡나매소항성사선경PCR감정적중조M. smegmatis mc2155,배양우middlebrook7H9 broth(M7H9)배양기중,병첨가10%M7H9 enrichment ADC화0.05%Tween 80,37 ℃배양48 h～72 h,42 ℃유도표체5 h,표체산물진행십이완기류산납-취병희선알응효전영(SDS-PAGE)급Western blot분석.결과 성공구건pBCG3000-E7C질립,SDS-PAGE현시표체산물적분자질량단위약위6.5 ku,여예기이론치상부,Western blot분석표체산물능피궁경암환자혈청식별.결론인류유두류병독16형E7C기인재M. smegmatis mc2155중성공표체.
