生物技术通讯
生物技術通訊
생물기술통신
LETTERS IN BIOTECHNOLOGY
2007年
3期
388-391
,共4页
于洋%文喻玲%赵庆欢%曹志亮%陈元鼎
于洋%文喻玲%趙慶歡%曹誌亮%陳元鼎
우양%문유령%조경환%조지량%진원정
轮状病毒%NSP3%克隆%表达
輪狀病毒%NSP3%剋隆%錶達
륜상병독%NSP3%극륭%표체
目的:获得轮状病毒NSP3基因的表达产物及其抗血清.方法:将TB-Chen株轮状病毒NSP3基因插入质粒pETL,构建重组表达质粒pET-NSP3,并转化大肠杆菌BL21(DE3)表达重组蛋白NSP3;用凝胶分离回收的方法纯化该蛋白,免疫豚鼠制备该蛋白的抗血清.结果:构建了重组表达质粒pET-NSP3,并在大肠杆菌中高效表达了重组蛋白NSP3,目的蛋白表达量占菌体总蛋白量的28.6%;有效地纯化了目的蛋白并制备了该蛋白的抗血清,Western印迹表明该抗血清能与重组蛋白NSP3发生特异性免疫反应.结论:通过质粒pETL能高效表达轮状病毒NSP3蛋白,该重组蛋白具有较好的免疫反应性,为进一步研究其结构、功能及免疫学性质奠定了基础.
目的:穫得輪狀病毒NSP3基因的錶達產物及其抗血清.方法:將TB-Chen株輪狀病毒NSP3基因插入質粒pETL,構建重組錶達質粒pET-NSP3,併轉化大腸桿菌BL21(DE3)錶達重組蛋白NSP3;用凝膠分離迴收的方法純化該蛋白,免疫豚鼠製備該蛋白的抗血清.結果:構建瞭重組錶達質粒pET-NSP3,併在大腸桿菌中高效錶達瞭重組蛋白NSP3,目的蛋白錶達量佔菌體總蛋白量的28.6%;有效地純化瞭目的蛋白併製備瞭該蛋白的抗血清,Western印跡錶明該抗血清能與重組蛋白NSP3髮生特異性免疫反應.結論:通過質粒pETL能高效錶達輪狀病毒NSP3蛋白,該重組蛋白具有較好的免疫反應性,為進一步研究其結構、功能及免疫學性質奠定瞭基礎.
목적:획득륜상병독NSP3기인적표체산물급기항혈청.방법:장TB-Chen주륜상병독NSP3기인삽입질립pETL,구건중조표체질립pET-NSP3,병전화대장간균BL21(DE3)표체중조단백NSP3;용응효분리회수적방법순화해단백,면역돈서제비해단백적항혈청.결과:구건료중조표체질립pET-NSP3,병재대장간균중고효표체료중조단백NSP3,목적단백표체량점균체총단백량적28.6%;유효지순화료목적단백병제비료해단백적항혈청,Western인적표명해항혈청능여중조단백NSP3발생특이성면역반응.결론:통과질립pETL능고효표체륜상병독NSP3단백,해중조단백구유교호적면역반응성,위진일보연구기결구、공능급면역학성질전정료기출.
