CAJ | 학술논문

背景:大量有关动物的体内外研究表明,骨髓间充质干细胞在心肌微环境或模拟心肌微环境的作用下可分化为心肌细胞.然而,类似的人类研究报道较少,同时相关的分化机制也不甚清楚.目的:探讨人类心肌匀浆上清液对骨髓间充质干细胞诱导分化的影响及相关基因的时序表达.方法:体外分离培养人类骨髓间充质干细胞,传至第4代加入自体心肌匀浆上清液诱导骨髓间充质干细胞,持续作用2周.相差显微镜下观察骨髓间充质干细胞形态变化,免疫荧光方法鉴定心肌特征性肌动蛋白α和肌钙蛋白的表达,应用半定量RT-PCR技术分析Nkx-2.5、GATA-4、MEF-2C、α-MHC、肌钙蛋白等相关基因在分化过程中的动态时序表达.结果与结论:经心肌匀浆上清液诱导后,骨髓间充质干细胞体积变大,立体感增强,形态近似棒状.诱导2周时肌动蛋白α及肌钙蛋白阳性细胞比例分别为25.53%和23.48%.Nkx-2.5、GATA-4、MEF-2C基因在诱导后3 d表达开始增强, 其中GATA-4、MEF-2C诱导后5 d达高峰,以后维持在较高水平,Nkx-2.5则随诱导时间逐渐增强;α-MHC、肌钙蛋白基因诱导前无表达,于诱导第3天出现表达,以后维持在高水平.结果提示,心肌匀浆上清液对骨髓间充质干细胞具有定向诱导作用,在此过程中,伴随着Nkx-2.5、GATA-4、MEF-2C、α-MHC和肌钙蛋白基因的时序表达变化.
배경:대량유관동물적체내외연구표명,골수간충질간세포재심기미배경혹모의심기미배경적작용하가분화위심기세포.연이,유사적인류연구보도교소,동시상관적분화궤제야불심청초.목적:탐토인류심기균장상청액대골수간충질간세포유도분화적영향급상관기인적시서표체.방법:체외분리배양인류골수간충질간세포,전지제4대가입자체심기균장상청액유도골수간충질간세포,지속작용2주.상차현미경하관찰골수간충질간세포형태변화,면역형광방법감정심기특정성기동단백α화기개단백적표체,응용반정량RT-PCR기술분석Nkx-2.5、GATA-4、MEF-2C、α-MHC、기개단백등상관기인재분화과정중적동태시서표체.결과여결론:경심기균장상청액유도후,골수간충질간세포체적변대,입체감증강,형태근사봉상.유도2주시기동단백α급기개단백양성세포비례분별위25.53%화23.48%.Nkx-2.5、GATA-4、MEF-2C기인재유도후3 d표체개시증강, 기중GATA-4、MEF-2C유도후5 d체고봉,이후유지재교고수평,Nkx-2.5칙수유도시간축점증강;α-MHC、기개단백기인유도전무표체,우유도제3천출현표체,이후유지재고수평.결과제시,심기균장상청액대골수간충질간세포구유정향유도작용,재차과정중,반수착Nkx-2.5、GATA-4、MEF-2C、α-MHC화기개단백기인적시서표체변화.