作物学报
作物學報
작물학보
ACTA AGRONOMICA SINICA
2011年
5期
918-923
,共6页
牟永潮%崔红%于晶%苍晶%曾俨%孟健男
牟永潮%崔紅%于晶%蒼晶%曾儼%孟健男
모영조%최홍%우정%창정%증엄%맹건남
东农冬麦1号%抗寒基因%抑制消减杂交(SSH)%表达序列标签(EST)%荧光定量PCR
東農鼕麥1號%抗寒基因%抑製消減雜交(SSH)%錶達序列標籤(EST)%熒光定量PCR
동농동맥1호%항한기인%억제소감잡교(SSH)%표체서렬표첨(EST)%형광정량PCR
为揭示高抗寒冬小麦品种东农冬麦1号的抗寒分子机制,在北方寒地自然条件下,于越冬前(5℃)和越冬期(-25℃)分别对分蘖节取样,利用抑制消减杂交技术构建该品种低温胁迫相关基因的cDNA文库.在cDNA文库中随机挑选300个阳性克隆测序,获得230条高质量的表达序列标签(EST).对该序列进行BLAST比对及功能注释,发现文库中基因组成类型复杂多样,其中应对胁迫的基因(如热激蛋白、CS66、Wcor8等)以及参与编码60S和40S核糖体亚基的基因出现的频率较高,这些基因可能与东农冬麦1号的安全越冬有密切关系.对文库中筛选到的2种未知基因和Clp基因进行荧光定量PCR分析,发现其表达水平随着温度降低而不同程度升高;在弱抗寒性小麦品种济麦22中,这些基因则有不同的表达模式.推测这些基因在抗低温胁迫过程中发挥重要作用.
為揭示高抗寒鼕小麥品種東農鼕麥1號的抗寒分子機製,在北方寒地自然條件下,于越鼕前(5℃)和越鼕期(-25℃)分彆對分蘗節取樣,利用抑製消減雜交技術構建該品種低溫脅迫相關基因的cDNA文庫.在cDNA文庫中隨機挑選300箇暘性剋隆測序,穫得230條高質量的錶達序列標籤(EST).對該序列進行BLAST比對及功能註釋,髮現文庫中基因組成類型複雜多樣,其中應對脅迫的基因(如熱激蛋白、CS66、Wcor8等)以及參與編碼60S和40S覈糖體亞基的基因齣現的頻率較高,這些基因可能與東農鼕麥1號的安全越鼕有密切關繫.對文庫中篩選到的2種未知基因和Clp基因進行熒光定量PCR分析,髮現其錶達水平隨著溫度降低而不同程度升高;在弱抗寒性小麥品種濟麥22中,這些基因則有不同的錶達模式.推測這些基因在抗低溫脅迫過程中髮揮重要作用.
위게시고항한동소맥품충동농동맥1호적항한분자궤제,재북방한지자연조건하,우월동전(5℃)화월동기(-25℃)분별대분얼절취양,이용억제소감잡교기술구건해품충저온협박상관기인적cDNA문고.재cDNA문고중수궤도선300개양성극륭측서,획득230조고질량적표체서렬표첨(EST).대해서렬진행BLAST비대급공능주석,발현문고중기인조성류형복잡다양,기중응대협박적기인(여열격단백、CS66、Wcor8등)이급삼여편마60S화40S핵당체아기적기인출현적빈솔교고,저사기인가능여동농동맥1호적안전월동유밀절관계.대문고중사선도적2충미지기인화Clp기인진행형광정량PCR분석,발현기표체수평수착온도강저이불동정도승고;재약항한성소맥품충제맥22중,저사기인칙유불동적표체모식.추측저사기인재항저온협박과정중발휘중요작용.