中华乳腺病杂志（电子版）
中華乳腺病雜誌（電子版）
중화유선병잡지（전자판）
CHINESE JOURNAL OF BREAST DISEASE(ELECTRONIC VERSION)
2011年
5期
565-575
,共11页
李学孝%吴爱国%胡斌%王梦川%纪术峰%邵国利%吴凯
李學孝%吳愛國%鬍斌%王夢川%紀術峰%邵國利%吳凱
리학효%오애국%호빈%왕몽천%기술봉%소국리%오개
乳腺肿瘤%小干扰RNA%细胞增殖%凋亡
乳腺腫瘤%小榦擾RNA%細胞增殖%凋亡
유선종류%소간우RNA%세포증식%조망
目的 研究DNA聚合酶θ(POLQ)在MCF-7乳腺癌细胞系中的表达及其对该细胞系体外增殖和早期凋亡的影响.方法 经脂质体LipofectamineTM2000介导将POLQ-siRNA转染入MCF-7乳腺癌细胞系中,MCF-7细胞被分为POLQ-siRNA组、Control-siRNA组和空白对照组;用实时荧光定量逆转录-多聚酶链反应(qRT-PCR)和Western blot分别从基因和蛋白水平检测POLQ表达率的变化;利用四甲基偶氮唑盐(MTT)法和平板克隆形成实验检测细胞增殖能力的变化;用流式细胞术判断转染前后细胞周期和凋亡率的改变.数据采用单因素方差分析和重复测量数据的方差分析进行统计.结果 POLQ在MCF-7乳腺癌细胞系中高表达,其相对分子质量(Mr)＞250 000,同时在Mr约170 000和100 000处容易检测到明显的条带.POLQ-siRNA组细胞POLQ mRNA平均表达量是空白对照组的(0.12±0.01)倍(P=0.00),POLQ蛋白表达率为(32.0±0.7)%.POLQ-siRNA组细胞增殖能力显著低于空白对照组(P=0.00);POLQ-siRNA组细胞克隆形成率明显低于空白对照组(P=0.00).转染后48 h,POLQ-siRNA组G0/G1期细胞比例显著高于空白对照组(P=0.00),S期细胞比例显著低于空白对照组(P=0.00),细胞早期凋亡率高于空白对照组(P=0.00),阴性对照组与空白对照组相比差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 POLQ在MCF-7乳腺癌细胞系中高表达,阻断该基因表达可以抑制细胞增殖,同时提高乳腺癌细胞的早期凋亡率.
目的 研究DNA聚閤酶θ(POLQ)在MCF-7乳腺癌細胞繫中的錶達及其對該細胞繫體外增殖和早期凋亡的影響.方法 經脂質體LipofectamineTM2000介導將POLQ-siRNA轉染入MCF-7乳腺癌細胞繫中,MCF-7細胞被分為POLQ-siRNA組、Control-siRNA組和空白對照組;用實時熒光定量逆轉錄-多聚酶鏈反應(qRT-PCR)和Western blot分彆從基因和蛋白水平檢測POLQ錶達率的變化;利用四甲基偶氮唑鹽(MTT)法和平闆剋隆形成實驗檢測細胞增殖能力的變化;用流式細胞術判斷轉染前後細胞週期和凋亡率的改變.數據採用單因素方差分析和重複測量數據的方差分析進行統計.結果 POLQ在MCF-7乳腺癌細胞繫中高錶達,其相對分子質量(Mr)＞250 000,同時在Mr約170 000和100 000處容易檢測到明顯的條帶.POLQ-siRNA組細胞POLQ mRNA平均錶達量是空白對照組的(0.12±0.01)倍(P=0.00),POLQ蛋白錶達率為(32.0±0.7)%.POLQ-siRNA組細胞增殖能力顯著低于空白對照組(P=0.00);POLQ-siRNA組細胞剋隆形成率明顯低于空白對照組(P=0.00).轉染後48 h,POLQ-siRNA組G0/G1期細胞比例顯著高于空白對照組(P=0.00),S期細胞比例顯著低于空白對照組(P=0.00),細胞早期凋亡率高于空白對照組(P=0.00),陰性對照組與空白對照組相比差異均無統計學意義(P＞0.05).結論 POLQ在MCF-7乳腺癌細胞繫中高錶達,阻斷該基因錶達可以抑製細胞增殖,同時提高乳腺癌細胞的早期凋亡率.
목적 연구DNA취합매θ(POLQ)재MCF-7유선암세포계중적표체급기대해세포계체외증식화조기조망적영향.방법 경지질체LipofectamineTM2000개도장POLQ-siRNA전염입MCF-7유선암세포계중,MCF-7세포피분위POLQ-siRNA조、Control-siRNA조화공백대조조;용실시형광정량역전록-다취매련반응(qRT-PCR)화Western blot분별종기인화단백수평검측POLQ표체솔적변화;이용사갑기우담서염(MTT)법화평판극륭형성실험검측세포증식능력적변화;용류식세포술판단전염전후세포주기화조망솔적개변.수거채용단인소방차분석화중복측량수거적방차분석진행통계.결과 POLQ재MCF-7유선암세포계중고표체,기상대분자질량(Mr)＞250 000,동시재Mr약170 000화100 000처용역검측도명현적조대.POLQ-siRNA조세포POLQ mRNA평균표체량시공백대조조적(0.12±0.01)배(P=0.00),POLQ단백표체솔위(32.0±0.7)%.POLQ-siRNA조세포증식능력현저저우공백대조조(P=0.00);POLQ-siRNA조세포극륭형성솔명현저우공백대조조(P=0.00).전염후48 h,POLQ-siRNA조G0/G1기세포비례현저고우공백대조조(P=0.00),S기세포비례현저저우공백대조조(P=0.00),세포조기조망솔고우공백대조조(P=0.00),음성대조조여공백대조조상비차이균무통계학의의(P＞0.05).결론 POLQ재MCF-7유선암세포계중고표체,조단해기인표체가이억제세포증식,동시제고유선암세포적조기조망솔.
