蚕业科学
蠶業科學
잠업과학
ACTA SERICOLOGICA SINICA
2012年
1期
32-40
,共9页
卢宝云%韩雪娟%袁传忠%李轶群%盖英萍%冀宪领
盧寶雲%韓雪娟%袁傳忠%李軼群%蓋英萍%冀憲領
로보운%한설연%원전충%리질군%개영평%기헌령
桑树%桑树黄化型萎缩病植原体%溶血素%基因克隆%序列结构特征%原核表达
桑樹%桑樹黃化型萎縮病植原體%溶血素%基因剋隆%序列結構特徵%原覈錶達
상수%상수황화형위축병식원체%용혈소%기인극륭%서렬결구특정%원핵표체
溶血素为细菌分泌的能够使细胞溶解的毒素,是病原菌重要的毒力因子.利用同源克隆技术得到桑树黄化型萎缩病植原体溶血素全长基因,命名为MDPH(GenBank登录号:HQ891118).MDPH全长717 bp,编码238个氨基酸,预测蛋白质分子质量为27.3 kD,等电点为9.29,氨基酸序列与其它植原体中已分离的溶血素有很高的同源性.蛋白质序列结构预测表明:MDPH的二级结构中富含α-螺旋,其次为β-折叠和无规卷曲,而β-转角仅占5.46％.对蛋白质序列的理化特征预测表明:MDPH有多个亲水和疏水区域,且疏水性强于亲水性；易形成跨膜螺旋,具有7个显著跨膜结构区；蛋白的抗原性较强,不含有明显的信号肽序列,为非经典分泌蛋白.将MDPH的编码区插入原核表达载体pET30a(+),并转化到E.coli BL21中,经过IPTG诱导,MDPH在BL21菌株中成功表达.研究结果为深入探讨MDPH的功能及植原体的致病机制奠定了基础.
溶血素為細菌分泌的能夠使細胞溶解的毒素,是病原菌重要的毒力因子.利用同源剋隆技術得到桑樹黃化型萎縮病植原體溶血素全長基因,命名為MDPH(GenBank登錄號:HQ891118).MDPH全長717 bp,編碼238箇氨基痠,預測蛋白質分子質量為27.3 kD,等電點為9.29,氨基痠序列與其它植原體中已分離的溶血素有很高的同源性.蛋白質序列結構預測錶明:MDPH的二級結構中富含α-螺鏇,其次為β-摺疊和無規捲麯,而β-轉角僅佔5.46％.對蛋白質序列的理化特徵預測錶明:MDPH有多箇親水和疏水區域,且疏水性彊于親水性；易形成跨膜螺鏇,具有7箇顯著跨膜結構區；蛋白的抗原性較彊,不含有明顯的信號肽序列,為非經典分泌蛋白.將MDPH的編碼區插入原覈錶達載體pET30a(+),併轉化到E.coli BL21中,經過IPTG誘導,MDPH在BL21菌株中成功錶達.研究結果為深入探討MDPH的功能及植原體的緻病機製奠定瞭基礎.
용혈소위세균분비적능구사세포용해적독소,시병원균중요적독력인자.이용동원극륭기술득도상수황화형위축병식원체용혈소전장기인,명명위MDPH(GenBank등록호:HQ891118).MDPH전장717 bp,편마238개안기산,예측단백질분자질량위27.3 kD,등전점위9.29,안기산서렬여기타식원체중이분리적용혈소유흔고적동원성.단백질서렬결구예측표명:MDPH적이급결구중부함α-라선,기차위β-절첩화무규권곡,이β-전각부점5.46％.대단백질서렬적이화특정예측표명:MDPH유다개친수화소수구역,차소수성강우친수성；역형성과막라선,구유7개현저과막결구구；단백적항원성교강,불함유명현적신호태서렬,위비경전분비단백.장MDPH적편마구삽입원핵표체재체pET30a(+),병전화도E.coli BL21중,경과IPTG유도,MDPH재BL21균주중성공표체.연구결과위심입탐토MDPH적공능급식원체적치병궤제전정료기출.
