湖北医药学院学报
湖北醫藥學院學報
호북의약학원학보
JOURNAL OF HUBAI UNIVERSITY OF MEDICINE
2011年
6期
557-560
,共4页
陈玲%严世荣%胡培%陈永梅%程龙海
陳玲%嚴世榮%鬍培%陳永梅%程龍海
진령%엄세영%호배%진영매%정룡해
甲基化%降落PCR%胰岛素样生长因子1受体%2型糖尿病%测序
甲基化%降落PCR%胰島素樣生長因子1受體%2型糖尿病%測序
갑기화%강락PCR%이도소양생장인자1수체%2형당뇨병%측서
目的:比较应用降落PCR(TD-PCR)及克隆测序检测2型糖尿病患者外周血白细胞中胰岛素样生长因子受体( IGF1 R)基因启动子区DNA甲基化位点的方法.方法:提取2型糖尿病患者外周血白细胞DNA进行亚硫酸氢盐处理,设计引物扩增IGF1R基因启动子区富含CG位点序列,分别行普通PCR和TD-PCR扩增,对含目的条带产物进行直接测序和克隆后测序.结果:与普通PCR扩增结果相比,TD-PCR扩增条带清晰、产物量多、二聚体少;且TD-PCR减少了对退火温度不断摸索的过程.克隆后测序峰图清晰,碱基丢失错判频率减少.结论:推荐应用TD-PCR检测亚硫酸氢盐处理的DNA甲基化位点,并进行克隆后测序.
目的:比較應用降落PCR(TD-PCR)及剋隆測序檢測2型糖尿病患者外週血白細胞中胰島素樣生長因子受體( IGF1 R)基因啟動子區DNA甲基化位點的方法.方法:提取2型糖尿病患者外週血白細胞DNA進行亞硫痠氫鹽處理,設計引物擴增IGF1R基因啟動子區富含CG位點序列,分彆行普通PCR和TD-PCR擴增,對含目的條帶產物進行直接測序和剋隆後測序.結果:與普通PCR擴增結果相比,TD-PCR擴增條帶清晰、產物量多、二聚體少;且TD-PCR減少瞭對退火溫度不斷摸索的過程.剋隆後測序峰圖清晰,堿基丟失錯判頻率減少.結論:推薦應用TD-PCR檢測亞硫痠氫鹽處理的DNA甲基化位點,併進行剋隆後測序.
목적:비교응용강락PCR(TD-PCR)급극륭측서검측2형당뇨병환자외주혈백세포중이도소양생장인자수체( IGF1 R)기인계동자구DNA갑기화위점적방법.방법:제취2형당뇨병환자외주혈백세포DNA진행아류산경염처리,설계인물확증IGF1R기인계동자구부함CG위점서렬,분별행보통PCR화TD-PCR확증,대함목적조대산물진행직접측서화극륭후측서.결과:여보통PCR확증결과상비,TD-PCR확증조대청석、산물량다、이취체소;차TD-PCR감소료대퇴화온도불단모색적과정.극륭후측서봉도청석,감기주실착판빈솔감소.결론:추천응용TD-PCR검측아류산경염처리적DNA갑기화위점,병진행극륭후측서.
