中华实验外科杂志
中華實驗外科雜誌
중화실험외과잡지
CHINESE JOURNAL OF EXPERIMENTAL SURGERY
2007年
5期
576-577
,共2页
潘卫兵%张青汉%余毅恺%叶绪龙%董能本%彭伟%Toshikazu Nakamura
潘衛兵%張青漢%餘毅愷%葉緒龍%董能本%彭偉%Toshikazu Nakamura
반위병%장청한%여의개%협서룡%동능본%팽위%Toshikazu Nakamura
膀胱肿瘤%基因治疗
膀胱腫瘤%基因治療
방광종류%기인치료
目的 观察转染NK4基因对膀胱癌上皮细胞HGF基因表达的影响.方法 利用脂质体Lipofectin-2000将质粒pcDNA3(+)/NK4导入BIU-87膀胱癌细胞,用pcDNA3(+)作为阴性对照.G418稳定筛选阳性细胞克隆后,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测转染细胞和对照组细胞NK4基因mRNA水平表达,Western blot检测转染后细胞培养上清液NK4和细胞胞质HGF蛋白的表达含量.结果 转染阳性细胞NK4 mRNA恒定表达,RT-PCR和Western blot分别显示在mRNA转录水平和蛋白表达水平,稳定转染的膀胱癌细胞NK4含量明显高于对照组.转染了NK4基因的肿瘤细胞HGF蛋白表达水平明显降低,而转染空载体则无作用.结论 脂质体将外源NK4基因导入肿瘤细胞后能稳定表达NK4蛋白,而且可以有效降低肿瘤细胞HGF表达的水平.
目的 觀察轉染NK4基因對膀胱癌上皮細胞HGF基因錶達的影響.方法 利用脂質體Lipofectin-2000將質粒pcDNA3(+)/NK4導入BIU-87膀胱癌細胞,用pcDNA3(+)作為陰性對照.G418穩定篩選暘性細胞剋隆後,逆轉錄-聚閤酶鏈反應(RT-PCR)檢測轉染細胞和對照組細胞NK4基因mRNA水平錶達,Western blot檢測轉染後細胞培養上清液NK4和細胞胞質HGF蛋白的錶達含量.結果 轉染暘性細胞NK4 mRNA恆定錶達,RT-PCR和Western blot分彆顯示在mRNA轉錄水平和蛋白錶達水平,穩定轉染的膀胱癌細胞NK4含量明顯高于對照組.轉染瞭NK4基因的腫瘤細胞HGF蛋白錶達水平明顯降低,而轉染空載體則無作用.結論 脂質體將外源NK4基因導入腫瘤細胞後能穩定錶達NK4蛋白,而且可以有效降低腫瘤細胞HGF錶達的水平.
목적 관찰전염NK4기인대방광암상피세포HGF기인표체적영향.방법 이용지질체Lipofectin-2000장질립pcDNA3(+)/NK4도입BIU-87방광암세포,용pcDNA3(+)작위음성대조.G418은정사선양성세포극륭후,역전록-취합매련반응(RT-PCR)검측전염세포화대조조세포NK4기인mRNA수평표체,Western blot검측전염후세포배양상청액NK4화세포포질HGF단백적표체함량.결과 전염양성세포NK4 mRNA항정표체,RT-PCR화Western blot분별현시재mRNA전록수평화단백표체수평,은정전염적방광암세포NK4함량명현고우대조조.전염료NK4기인적종류세포HGF단백표체수평명현강저,이전염공재체칙무작용.결론 지질체장외원NK4기인도입종류세포후능은정표체NK4단백,이차가이유효강저종류세포HGF표체적수평.
