CAJ | 학술논문

目的:建立鸭乙型肝炎病毒核酸(DHBV DNA)荧光定量的方法.方法:根据DHBV DNA s基因区的序列设计扩增所需3条引物,通过偶联反应用AmpliSensor荧光信号标记半巢式引物,经过前期不对称扩增、半巢式扩增及在线检测建立DHBV DNA阳性标准品QPCR的标准曲线,并将70份鸭血清分别用荧光定量PCR方法和地高辛标记的DHBV DNA探针斑点杂交的方法检测,比较结果的相关性.结果:DHBVDNA阳性标准品经过30次循环后,扩增产物经2%琼脂糖凝胶电泳检测,可以看出有180bp、70bp两个片段,与设计的片段大小相符,扩增产物的浓度与标准品的起始浓度成正比,扩增指数的数值大小与该循环时已合成的扩增产物的量成正比,起始浓度的大小与要合成的一定扩增产物的量所需的循环次数成反比.用荧定量PCR方法和斑点杂交的方法检测血清中DHBVDNA的结果有良好的相关性(r=0.97,P＜0.01,v=58).结论:荧光定量PCR方法可作为检测DHBV DNA含量的一个重要手段.
목적:건립압을형간염병독핵산(DHBV DNA)형광정량적방법.방법:근거DHBV DNA s기인구적서렬설계확증소수3조인물,통과우련반응용AmpliSensor형광신호표기반소식인물,경과전기불대칭확증、반소식확증급재선검측건립DHBV DNA양성표준품QPCR적표준곡선,병장70빈압혈청분별용형광정량PCR방법화지고신표기적DHBV DNA탐침반점잡교적방법검측,비교결과적상관성.결과:DHBVDNA양성표준품경과30차순배후,확증산물경2%경지당응효전영검측,가이간출유180bp、70bp량개편단,여설계적편단대소상부,확증산물적농도여표준품적기시농도성정비,확증지수적수치대소여해순배시이합성적확증산물적량성정비,기시농도적대소여요합성적일정확증산물적량소수적순배차수성반비.용형정량PCR방법화반점잡교적방법검측혈청중DHBVDNA적결과유량호적상관성(r=0.97,P＜0.01,v=58).결론:형광정량PCR방법가작위검측DHBV DNA함량적일개중요수단.