畜牧兽医学报
畜牧獸醫學報
축목수의학보
2000年
2期
150-154
,共5页
赵军%张秀根%陈溥言%蔡宝祥
趙軍%張秀根%陳溥言%蔡寶祥
조군%장수근%진부언%채보상
重组HVT%新城疫病毒%HN基因
重組HVT%新城疫病毒%HN基因
중조HVT%신성역병독%HN기인
应用聚合酶链反应(PCR)技术,用设计带有限制性酶切位点的特异地扩增了从起始密码子开始的1.8kb新城疫病毒(NDV)血凝素-神经氨酸(HN)基因开放式阅读框(ORF),然后插入pTK2B的Nhe I位点,构建了含NDV HN基因的插入载体pTK HN1和pTK HN2,将其与感染火鸡疱疹病毒(HVT)细胞的总DNA共转染鸡胚成纤维细胞(CEF),经有限稀释法和Dot-blot筛选,得到含有HN基因的重组体rHVT1和rHVT2.对重组体进行组织培养传代和Western blot分析,表明重组体在感染细胞中表达了HN蛋白,重组体在CEF上的生长特性与亲本病毒相同,且在连续传代过程中保持稳定.
應用聚閤酶鏈反應(PCR)技術,用設計帶有限製性酶切位點的特異地擴增瞭從起始密碼子開始的1.8kb新城疫病毒(NDV)血凝素-神經氨痠(HN)基因開放式閱讀框(ORF),然後插入pTK2B的Nhe I位點,構建瞭含NDV HN基因的插入載體pTK HN1和pTK HN2,將其與感染火鷄皰疹病毒(HVT)細胞的總DNA共轉染鷄胚成纖維細胞(CEF),經有限稀釋法和Dot-blot篩選,得到含有HN基因的重組體rHVT1和rHVT2.對重組體進行組織培養傳代和Western blot分析,錶明重組體在感染細胞中錶達瞭HN蛋白,重組體在CEF上的生長特性與親本病毒相同,且在連續傳代過程中保持穩定.
응용취합매련반응(PCR)기술,용설계대유한제성매절위점적특이지확증료종기시밀마자개시적1.8kb신성역병독(NDV)혈응소-신경안산(HN)기인개방식열독광(ORF),연후삽입pTK2B적Nhe I위점,구건료함NDV HN기인적삽입재체pTK HN1화pTK HN2,장기여감염화계포진병독(HVT)세포적총DNA공전염계배성섬유세포(CEF),경유한희석법화Dot-blot사선,득도함유HN기인적중조체rHVT1화rHVT2.대중조체진행조직배양전대화Western blot분석,표명중조체재감염세포중표체료HN단백,중조체재CEF상적생장특성여친본병독상동,차재련속전대과정중보지은정.
