生物技术
生物技術
생물기술
BIOTECHNOLOGY
2004年
3期
14-15
,共2页
单文娟%张富春%刘忠渊%朱馨蕾
單文娟%張富春%劉忠淵%硃馨蕾
단문연%장부춘%류충연%주형뢰
草原兔尾鼠%卵透明带3%Pichia pastoris%分泌表达
草原兔尾鼠%卵透明帶3%Pichia pastoris%分泌錶達
초원토미서%란투명대3%Pichia pastoris%분비표체
本研究通过酵母Pichiapa storis系统表达草原兔尾鼠卵透明带3(IZP3)蛋白,获得控制害鼠生育研究的抗原物质.根据本实验室克隆获得的IZP3基因序列设计引物,并分别在5'引物和3'引物中引入了EcoR I和Xba I酶切位点.经PCR扩增,将IZP3克隆至穿梭质粒pSuper Y上,获得的重组穿梭质粒pSuperY-IZP3经线性化后,采用电激法将重组穿梭质粒转入酵母SMDll68菌株中,Zeocin+筛选阳性克隆,经小瓶发酵后,取上清作SDS-PAGE和Western-blot检测,结果表明IZP3在酵母中得到了成功表达,表达产物的分子量约为55kD,为IZP3免疫不育控制鼠害的研究提供了检测抗原.
本研究通過酵母Pichiapa storis繫統錶達草原兔尾鼠卵透明帶3(IZP3)蛋白,穫得控製害鼠生育研究的抗原物質.根據本實驗室剋隆穫得的IZP3基因序列設計引物,併分彆在5'引物和3'引物中引入瞭EcoR I和Xba I酶切位點.經PCR擴增,將IZP3剋隆至穿梭質粒pSuper Y上,穫得的重組穿梭質粒pSuperY-IZP3經線性化後,採用電激法將重組穿梭質粒轉入酵母SMDll68菌株中,Zeocin+篩選暘性剋隆,經小瓶髮酵後,取上清作SDS-PAGE和Western-blot檢測,結果錶明IZP3在酵母中得到瞭成功錶達,錶達產物的分子量約為55kD,為IZP3免疫不育控製鼠害的研究提供瞭檢測抗原.
본연구통과효모Pichiapa storis계통표체초원토미서란투명대3(IZP3)단백,획득공제해서생육연구적항원물질.근거본실험실극륭획득적IZP3기인서렬설계인물,병분별재5'인물화3'인물중인입료EcoR I화Xba I매절위점.경PCR확증,장IZP3극륭지천사질립pSuper Y상,획득적중조천사질립pSuperY-IZP3경선성화후,채용전격법장중조천사질립전입효모SMDll68균주중,Zeocin+사선양성극륭,경소병발효후,취상청작SDS-PAGE화Western-blot검측,결과표명IZP3재효모중득도료성공표체,표체산물적분자량약위55kD,위IZP3면역불육공제서해적연구제공료검측항원.
