中国药学杂志
中國藥學雜誌
중국약학잡지
CHINESE PHARMACEUTICAL JOURNAL
2005年
4期
302-304
,共3页
赵明%潘映红%王一丁%郭宝林%冯定胜
趙明%潘映紅%王一丁%郭寶林%馮定勝
조명%반영홍%왕일정%곽보림%풍정성
溶栓活性%体外检测%聚丙烯酰胺%纤维蛋白胶板法
溶栓活性%體外檢測%聚丙烯酰胺%纖維蛋白膠闆法
용전활성%체외검측%취병희선알%섬유단백효판법
目的建立一种用于体外溶栓活性精确定量分析和高通量溶栓药物筛选鉴定的方法.方法使用聚丙烯酰胺代替琼脂糖作载体,用平板电泳制胶模具代替玻璃或塑料平皿制作可控制厚度的、均匀的薄层聚丙烯酰胺纤维蛋白胶板,用染色剂指示纤维蛋白降解情况.结果最适条件为胶板胶含0.5 mg·mL-1纤维蛋白原和10%丙烯酰胺,加样后37℃保湿温育8~12h,用考马斯亮蓝染色,观察纤维蛋白降解后产生的透明圈.本方法最低可检测出25ng蚓激酶的活性;蚓激酶浓度在0.01~5mg·mL-1时,浓度对数与其所产生的透明圈两垂直直径算术平均值平方的对数成良好的线性关系(r=0.999 7);重复性试验RSD为3.83%(n=5).结论本方法是一种值得推广的溶栓活性体外检测方法.
目的建立一種用于體外溶栓活性精確定量分析和高通量溶栓藥物篩選鑒定的方法.方法使用聚丙烯酰胺代替瓊脂糖作載體,用平闆電泳製膠模具代替玻璃或塑料平皿製作可控製厚度的、均勻的薄層聚丙烯酰胺纖維蛋白膠闆,用染色劑指示纖維蛋白降解情況.結果最適條件為膠闆膠含0.5 mg·mL-1纖維蛋白原和10%丙烯酰胺,加樣後37℃保濕溫育8~12h,用攷馬斯亮藍染色,觀察纖維蛋白降解後產生的透明圈.本方法最低可檢測齣25ng蚓激酶的活性;蚓激酶濃度在0.01~5mg·mL-1時,濃度對數與其所產生的透明圈兩垂直直徑算術平均值平方的對數成良好的線性關繫(r=0.999 7);重複性試驗RSD為3.83%(n=5).結論本方法是一種值得推廣的溶栓活性體外檢測方法.
목적건립일충용우체외용전활성정학정량분석화고통량용전약물사선감정적방법.방법사용취병희선알대체경지당작재체,용평판전영제효모구대체파리혹소료평명제작가공제후도적、균균적박층취병희선알섬유단백효판,용염색제지시섬유단백강해정황.결과최괄조건위효판효함0.5 mg·mL-1섬유단백원화10%병희선알,가양후37℃보습온육8~12h,용고마사량람염색,관찰섬유단백강해후산생적투명권.본방법최저가검측출25ng인격매적활성;인격매농도재0.01~5mg·mL-1시,농도대수여기소산생적투명권량수직직경산술평균치평방적대수성량호적선성관계(r=0.999 7);중복성시험RSD위3.83%(n=5).결론본방법시일충치득추엄적용전활성체외검측방법.