吉林农业大学学报
吉林農業大學學報
길임농업대학학보
JOURNAL OF JILIN AGRICUL TURAL UNIVERSITY
2006年
6期
667-670
,共4页
杨文艳%杨连玉%耿春银%赵颖彩
楊文豔%楊連玉%耿春銀%趙穎綵
양문염%양련옥%경춘은%조영채
Ghrelln%真核表达%重组质粒%猪
Ghrelln%真覈錶達%重組質粒%豬
Ghrelln%진핵표체%중조질립%저
从猪胃组织中提取总RNA,采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术,经扩增得到450 bp Ghrelin基因.将其克隆到pMD18-T中,经双酶切初步鉴定后,将酶切下的目的基因进一步克隆到真核表达载体PCI中,经PCR、酶切及序列鉴定,证实插入载体PCI中的片段为含有目的基因的核苷酸序列,真核表达重组质粒PCI-Ghrelin-28aa构建成功;以构建的PCI-Ghrelin-28aa质粒肌肉注射(1 mg/kg)昆明小鼠(体重18～20g),观察其体重变化.结果表明:注射该基因质粒5 d后,实验组小鼠平均日增重高于对照组,且差异显著(P＜0.05),尤其是注射10～15 d增重最为明显.本试验构建的PCI-Ghrelin-28aa基因质粒对小鼠具有明显的促生长作用,并将成为新的促猪生长的基因药物.
從豬胃組織中提取總RNA,採用反轉錄-聚閤酶鏈反應(RT-PCR)技術,經擴增得到450 bp Ghrelin基因.將其剋隆到pMD18-T中,經雙酶切初步鑒定後,將酶切下的目的基因進一步剋隆到真覈錶達載體PCI中,經PCR、酶切及序列鑒定,證實插入載體PCI中的片段為含有目的基因的覈苷痠序列,真覈錶達重組質粒PCI-Ghrelin-28aa構建成功;以構建的PCI-Ghrelin-28aa質粒肌肉註射(1 mg/kg)昆明小鼠(體重18～20g),觀察其體重變化.結果錶明:註射該基因質粒5 d後,實驗組小鼠平均日增重高于對照組,且差異顯著(P＜0.05),尤其是註射10～15 d增重最為明顯.本試驗構建的PCI-Ghrelin-28aa基因質粒對小鼠具有明顯的促生長作用,併將成為新的促豬生長的基因藥物.
종저위조직중제취총RNA,채용반전록-취합매련반응(RT-PCR)기술,경확증득도450 bp Ghrelin기인.장기극륭도pMD18-T중,경쌍매절초보감정후,장매절하적목적기인진일보극륭도진핵표체재체PCI중,경PCR、매절급서렬감정,증실삽입재체PCI중적편단위함유목적기인적핵감산서렬,진핵표체중조질립PCI-Ghrelin-28aa구건성공;이구건적PCI-Ghrelin-28aa질립기육주사(1 mg/kg)곤명소서(체중18～20g),관찰기체중변화.결과표명:주사해기인질립5 d후,실험조소서평균일증중고우대조조,차차이현저(P＜0.05),우기시주사10～15 d증중최위명현.본시험구건적PCI-Ghrelin-28aa기인질립대소서구유명현적촉생장작용,병장성위신적촉저생장적기인약물.
