口腔医学研究
口腔醫學研究
구강의학연구
JOURNAL OF ORAL SCIENCE RESEARCH
2007年
1期
28-31
,共4页
曹颖光%王戎%宋珂%王华均
曹穎光%王戎%宋珂%王華均
조영광%왕융%송가%왕화균
转化生长因子β1%增强型绿色荧光蛋白%骨髓间充质干细胞
轉化生長因子β1%增彊型綠色熒光蛋白%骨髓間充質榦細胞
전화생장인자β1%증강형록색형광단백%골수간충질간세포
目的:构建p TGF-β1-IRES2-EGFP双顺反子真核表达载体,检测其在骨髓间充质干细胞(BMSCs)中的表达,为研究基因修饰细胞回植后的迁移转归及成骨作用提供实验基础.方法:构建p TGF-β1-IRES2-EGFP双顺反子真核表达载体,p TGF-β1-IRES2-EGFP与pIRES2-EGFP分别转染BMSCs, 并设空白对照.荧光显微镜和细胞免疫组化分别检测GFP和TGF-β1的表达.结果:成功地构建含TGF-β1基因和EGFP基因的真核表达载体.G418筛选10～15 d后有抗性克隆形成.p TGF-β1-IRES2-EGFP转染组抗性克隆中,GFP表达的同时有TGF-β1的表达,而部分抗性克隆(约20%)中有TGF-β1表达的却无GFP表达.pIRES2-EGFP转染组的抗性克隆中有EGFP表达,但无TGF-β1表达.结论:利用IRES构建的含TGF-β1基因和GFP基因的双顺反子真核表达载体,能在部分BMSCs中同时获得表达,可以作为TGF-β1基因修饰BMSCs体内回植后追踪其成骨作用的方法.
目的:構建p TGF-β1-IRES2-EGFP雙順反子真覈錶達載體,檢測其在骨髓間充質榦細胞(BMSCs)中的錶達,為研究基因脩飾細胞迴植後的遷移轉歸及成骨作用提供實驗基礎.方法:構建p TGF-β1-IRES2-EGFP雙順反子真覈錶達載體,p TGF-β1-IRES2-EGFP與pIRES2-EGFP分彆轉染BMSCs, 併設空白對照.熒光顯微鏡和細胞免疫組化分彆檢測GFP和TGF-β1的錶達.結果:成功地構建含TGF-β1基因和EGFP基因的真覈錶達載體.G418篩選10～15 d後有抗性剋隆形成.p TGF-β1-IRES2-EGFP轉染組抗性剋隆中,GFP錶達的同時有TGF-β1的錶達,而部分抗性剋隆(約20%)中有TGF-β1錶達的卻無GFP錶達.pIRES2-EGFP轉染組的抗性剋隆中有EGFP錶達,但無TGF-β1錶達.結論:利用IRES構建的含TGF-β1基因和GFP基因的雙順反子真覈錶達載體,能在部分BMSCs中同時穫得錶達,可以作為TGF-β1基因脩飾BMSCs體內迴植後追蹤其成骨作用的方法.
목적:구건p TGF-β1-IRES2-EGFP쌍순반자진핵표체재체,검측기재골수간충질간세포(BMSCs)중적표체,위연구기인수식세포회식후적천이전귀급성골작용제공실험기출.방법:구건p TGF-β1-IRES2-EGFP쌍순반자진핵표체재체,p TGF-β1-IRES2-EGFP여pIRES2-EGFP분별전염BMSCs, 병설공백대조.형광현미경화세포면역조화분별검측GFP화TGF-β1적표체.결과:성공지구건함TGF-β1기인화EGFP기인적진핵표체재체.G418사선10～15 d후유항성극륭형성.p TGF-β1-IRES2-EGFP전염조항성극륭중,GFP표체적동시유TGF-β1적표체,이부분항성극륭(약20%)중유TGF-β1표체적각무GFP표체.pIRES2-EGFP전염조적항성극륭중유EGFP표체,단무TGF-β1표체.결론:이용IRES구건적함TGF-β1기인화GFP기인적쌍순반자진핵표체재체,능재부분BMSCs중동시획득표체,가이작위TGF-β1기인수식BMSCs체내회식후추종기성골작용적방법.
