浙江大学学报(医学版)
浙江大學學報(醫學版)
절강대학학보(의학판)
JOURNAL OF ZHEJIANG UNIVERSITY MEDICAL SCIENCES
2007年
1期
61-65
,共5页
聚四氟乙烯%血管内皮生长因子类%人工血管%可行性研究%转染%基因
聚四氟乙烯%血管內皮生長因子類%人工血管%可行性研究%轉染%基因
취사불을희%혈관내피생장인자류%인공혈관%가행성연구%전염%기인
目的:探讨聚四氟乙烯(PTFE)人工血管携载血管内皮生长因子(VEGF)基因并转染移植部位组织细胞的可行性.方法:将pCDI-hVEGF121质粒溶液处理过的PTFE人工血管修剪成细条,溴化乙锭(EB)标记,在紫外光下观察其吸附基因质粒的情况.将经质粒溶液处理的血管材料置于生理盐水,并于不同的时间检测溶液的吸光度,计算出溶液的VEGF基因质粒浓度,绘出体外释放曲线.将经质粒溶液处理的血管材料(基因组,n=24)和经白蛋白溶液处理的血管材料(对照组,n=24)分别植入家兔左、右大腿肌肉,实验按不同的时间,经RT-PCR半定量检测移植血管材料周围骨骼肌中VEGF121mRNA表达水平,Western blot检测VEGF121蛋白表达.结果:吸附了VEGF基因质粒的血管材料经EB标记后,在紫外光下呈蓝紫荧光.体外释放曲线显示0.5~4 h基因释放较快,随后进入缓慢增长期,直至72 h仍有基因的释放,但释放速率明显减慢.RT-PCR和Western blot显示,PTFE埋植后第1天、1周、2周、4周、6周和8周的标本hVEGF121mRNA相对于β-actin mRNA的表达量,分别为1.053±0.356、1.718±0.404、2.021±0.303、1.872±0.231、0.986±0.254和0.340±0.116;VEGF121蛋白相对表达量为0.328±0.088、1.019±0.105、2.249±0.203、2.036±0.079、1.670±0.132和0.636±0.107.结论:PTFE血管材料能携载VEGF基因质粒并进行骨骼肌的转染.
目的:探討聚四氟乙烯(PTFE)人工血管攜載血管內皮生長因子(VEGF)基因併轉染移植部位組織細胞的可行性.方法:將pCDI-hVEGF121質粒溶液處理過的PTFE人工血管脩剪成細條,溴化乙錠(EB)標記,在紫外光下觀察其吸附基因質粒的情況.將經質粒溶液處理的血管材料置于生理鹽水,併于不同的時間檢測溶液的吸光度,計算齣溶液的VEGF基因質粒濃度,繪齣體外釋放麯線.將經質粒溶液處理的血管材料(基因組,n=24)和經白蛋白溶液處理的血管材料(對照組,n=24)分彆植入傢兔左、右大腿肌肉,實驗按不同的時間,經RT-PCR半定量檢測移植血管材料週圍骨骼肌中VEGF121mRNA錶達水平,Western blot檢測VEGF121蛋白錶達.結果:吸附瞭VEGF基因質粒的血管材料經EB標記後,在紫外光下呈藍紫熒光.體外釋放麯線顯示0.5~4 h基因釋放較快,隨後進入緩慢增長期,直至72 h仍有基因的釋放,但釋放速率明顯減慢.RT-PCR和Western blot顯示,PTFE埋植後第1天、1週、2週、4週、6週和8週的標本hVEGF121mRNA相對于β-actin mRNA的錶達量,分彆為1.053±0.356、1.718±0.404、2.021±0.303、1.872±0.231、0.986±0.254和0.340±0.116;VEGF121蛋白相對錶達量為0.328±0.088、1.019±0.105、2.249±0.203、2.036±0.079、1.670±0.132和0.636±0.107.結論:PTFE血管材料能攜載VEGF基因質粒併進行骨骼肌的轉染.
목적:탐토취사불을희(PTFE)인공혈관휴재혈관내피생장인자(VEGF)기인병전염이식부위조직세포적가행성.방법:장pCDI-hVEGF121질립용액처리과적PTFE인공혈관수전성세조,추화을정(EB)표기,재자외광하관찰기흡부기인질립적정황.장경질립용액처리적혈관재료치우생리염수,병우불동적시간검측용액적흡광도,계산출용액적VEGF기인질립농도,회출체외석방곡선.장경질립용액처리적혈관재료(기인조,n=24)화경백단백용액처리적혈관재료(대조조,n=24)분별식입가토좌、우대퇴기육,실험안불동적시간,경RT-PCR반정량검측이식혈관재료주위골격기중VEGF121mRNA표체수평,Western blot검측VEGF121단백표체.결과:흡부료VEGF기인질립적혈관재료경EB표기후,재자외광하정람자형광.체외석방곡선현시0.5~4 h기인석방교쾌,수후진입완만증장기,직지72 h잉유기인적석방,단석방속솔명현감만.RT-PCR화Western blot현시,PTFE매식후제1천、1주、2주、4주、6주화8주적표본hVEGF121mRNA상대우β-actin mRNA적표체량,분별위1.053±0.356、1.718±0.404、2.021±0.303、1.872±0.231、0.986±0.254화0.340±0.116;VEGF121단백상대표체량위0.328±0.088、1.019±0.105、2.249±0.203、2.036±0.079、1.670±0.132화0.636±0.107.결론:PTFE혈관재료능휴재VEGF기인질립병진행골격기적전염.