癌变·畸变·突变
癌變·畸變·突變
암변·기변·돌변
CARCINOGENSES,TERATOGENSIS AND MUTAGENESIS
2012年
3期
205-208,212
,共5页
徐可%刘明发%金涛%蒋嵩山%许海雄
徐可%劉明髮%金濤%蔣嵩山%許海雄
서가%류명발%금도%장숭산%허해웅
miRNA-128-1%表达调控%人胚肾细胞
miRNA-128-1%錶達調控%人胚腎細胞
miRNA-128-1%표체조공%인배신세포
目的:初步研究人胚肾细胞HEK293中miRNA- 128-1的表达调控机制,为进一步探讨miRNA-128-1在胶质瘤中的表达调控奠定基础.方法:通过软件UCSC预测miRNA-128-1的启动子区域;运用软件UCSC、CBIL预测可能与miRNA-128-1启动子区域结合的候选转录因子;构建相关质粒,包括pB-miRNA-128-1、pShNF1、pShc-Myc、pShTAF1、pShYY1、pShMAF、pShRELA2、pShRNUX1和pShNFkappaB.然后将pB-miRNA-128-1分别与上述质粒共转染人胚肾细胞HEK293,检测报告基因活性,确定候选转录因子的作用性质.结果:共转染pShc-Myc可显著抑制pB-miRNA- 128-1启动子报告基因的活性;共转染pShNFkappaB可显著升高pB-miRNA-128-1启动子报告基因的活性;共转染pShNF1、pShTAF1、pShYY1、pShMAF、pShRELA2或pShRNUX1对pB-miRNA-128-1启动子报告基因的活性未见明显影响.结论:在HEK293细胞miRNA-128-1的表达调控中,c-Myc可能发挥转录激活作用,而NFkappaB可能发挥转录抑制作用.
目的:初步研究人胚腎細胞HEK293中miRNA- 128-1的錶達調控機製,為進一步探討miRNA-128-1在膠質瘤中的錶達調控奠定基礎.方法:通過軟件UCSC預測miRNA-128-1的啟動子區域;運用軟件UCSC、CBIL預測可能與miRNA-128-1啟動子區域結閤的候選轉錄因子;構建相關質粒,包括pB-miRNA-128-1、pShNF1、pShc-Myc、pShTAF1、pShYY1、pShMAF、pShRELA2、pShRNUX1和pShNFkappaB.然後將pB-miRNA-128-1分彆與上述質粒共轉染人胚腎細胞HEK293,檢測報告基因活性,確定候選轉錄因子的作用性質.結果:共轉染pShc-Myc可顯著抑製pB-miRNA- 128-1啟動子報告基因的活性;共轉染pShNFkappaB可顯著升高pB-miRNA-128-1啟動子報告基因的活性;共轉染pShNF1、pShTAF1、pShYY1、pShMAF、pShRELA2或pShRNUX1對pB-miRNA-128-1啟動子報告基因的活性未見明顯影響.結論:在HEK293細胞miRNA-128-1的錶達調控中,c-Myc可能髮揮轉錄激活作用,而NFkappaB可能髮揮轉錄抑製作用.
목적:초보연구인배신세포HEK293중miRNA- 128-1적표체조공궤제,위진일보탐토miRNA-128-1재효질류중적표체조공전정기출.방법:통과연건UCSC예측miRNA-128-1적계동자구역;운용연건UCSC、CBIL예측가능여miRNA-128-1계동자구역결합적후선전록인자;구건상관질립,포괄pB-miRNA-128-1、pShNF1、pShc-Myc、pShTAF1、pShYY1、pShMAF、pShRELA2、pShRNUX1화pShNFkappaB.연후장pB-miRNA-128-1분별여상술질립공전염인배신세포HEK293,검측보고기인활성,학정후선전록인자적작용성질.결과:공전염pShc-Myc가현저억제pB-miRNA- 128-1계동자보고기인적활성;공전염pShNFkappaB가현저승고pB-miRNA-128-1계동자보고기인적활성;공전염pShNF1、pShTAF1、pShYY1、pShMAF、pShRELA2혹pShRNUX1대pB-miRNA-128-1계동자보고기인적활성미견명현영향.결론:재HEK293세포miRNA-128-1적표체조공중,c-Myc가능발휘전록격활작용,이NFkappaB가능발휘전록억제작용.