中国实验血液学杂志
中國實驗血液學雜誌
중국실험혈액학잡지
JOURNAL OF EXPERIMENTAL HEMATOLOGY
2010年
1期
122-126
,共5页
李庆华%金薇娜%张华梅%茹永新%庞天翔
李慶華%金薇娜%張華梅%茹永新%龐天翔
리경화%금미나%장화매%여영신%방천상
基因敲除%基因沉默%Sam68%DT40
基因敲除%基因沉默%Sam68%DT40
기인고제%기인침묵%Sam68%DT40
本研究比较细胞系同源重组基因敲除(gene knockout)与siRNA基因沉默(gene silence)二种技术方法用于研究蛋白功能方面的效果差异.对鸡B淋巴细胞瘤来源的DT40细胞系,应用基因打靶技术分离出Sam68基因缺失的细胞株,并且利用稳定表达siRNA的质粒pSilencer-Sam68得到Sam68基因沉默的细胞株.与野生型细胞株相比,对这些细胞株进行Sam68的功能解析.结果表明:Sam68基因缺失细胞表现出明显的生长速度迟缓,通过细胞周期检测揭示这些细胞生长速度延迟是由于细胞周期中的G2/M期延长;但在Sam68基因沉默细胞中却没有看到这些变化.结论:针对活细胞中的蛋白功能研究,应用细胞系基因敲除技术比siRNA基因沉默技术能够得到更加清晰的实验结果.
本研究比較細胞繫同源重組基因敲除(gene knockout)與siRNA基因沉默(gene silence)二種技術方法用于研究蛋白功能方麵的效果差異.對鷄B淋巴細胞瘤來源的DT40細胞繫,應用基因打靶技術分離齣Sam68基因缺失的細胞株,併且利用穩定錶達siRNA的質粒pSilencer-Sam68得到Sam68基因沉默的細胞株.與野生型細胞株相比,對這些細胞株進行Sam68的功能解析.結果錶明:Sam68基因缺失細胞錶現齣明顯的生長速度遲緩,通過細胞週期檢測揭示這些細胞生長速度延遲是由于細胞週期中的G2/M期延長;但在Sam68基因沉默細胞中卻沒有看到這些變化.結論:針對活細胞中的蛋白功能研究,應用細胞繫基因敲除技術比siRNA基因沉默技術能夠得到更加清晰的實驗結果.
본연구비교세포계동원중조기인고제(gene knockout)여siRNA기인침묵(gene silence)이충기술방법용우연구단백공능방면적효과차이.대계B림파세포류래원적DT40세포계,응용기인타파기술분리출Sam68기인결실적세포주,병차이용은정표체siRNA적질립pSilencer-Sam68득도Sam68기인침묵적세포주.여야생형세포주상비,대저사세포주진행Sam68적공능해석.결과표명:Sam68기인결실세포표현출명현적생장속도지완,통과세포주기검측게시저사세포생장속도연지시유우세포주기중적G2/M기연장;단재Sam68기인침묵세포중각몰유간도저사변화.결론:침대활세포중적단백공능연구,응용세포계기인고제기술비siRNA기인침묵기술능구득도경가청석적실험결과.
