临床肺科杂志
臨床肺科雜誌
림상폐과잡지
JOUNAL OF CLINICAL PULMONARY MEDICINE
2010年
11期
1560-1562
,共3页
邢爱英%刘忠泉%贾红彦%杜博平%古淑香%张宗德
邢愛英%劉忠泉%賈紅彥%杜博平%古淑香%張宗德
형애영%류충천%가홍언%두박평%고숙향%장종덕
真核表达%复苏因子D%中国仓鼠细胞
真覈錶達%複囌因子D%中國倉鼠細胞
진핵표체%복소인자D%중국창서세포
目的 构建结核分枝杆菌复苏因子D基因(RpfD)真核表达载体,为结核分枝杆菌复苏因子DNA疫苗的研究奠定基础.方法 PCR扩增复苏因子D基因片段,克隆至PcDNA3.1(-)载体中,重组质粒测序正确后,转染至CHO细胞中.通过G418筛选,RT-PCR检测克隆基因mRNA在真核细胞的表达,Western blot检测目的 蛋白的表达.结果 构建了PcDNA-RpfD表达载体,RT-PCR证实构建的载体能在CHO细胞中表达RpfD基因mRNA,Western blot证实转染了载体的CHO能表达RpfD蛋白质.结论 成功构建PcDNA-RpfD真核表达载体,转染细胞CHO能表达RpfD蛋白质.
目的 構建結覈分枝桿菌複囌因子D基因(RpfD)真覈錶達載體,為結覈分枝桿菌複囌因子DNA疫苗的研究奠定基礎.方法 PCR擴增複囌因子D基因片段,剋隆至PcDNA3.1(-)載體中,重組質粒測序正確後,轉染至CHO細胞中.通過G418篩選,RT-PCR檢測剋隆基因mRNA在真覈細胞的錶達,Western blot檢測目的 蛋白的錶達.結果 構建瞭PcDNA-RpfD錶達載體,RT-PCR證實構建的載體能在CHO細胞中錶達RpfD基因mRNA,Western blot證實轉染瞭載體的CHO能錶達RpfD蛋白質.結論 成功構建PcDNA-RpfD真覈錶達載體,轉染細胞CHO能錶達RpfD蛋白質.
목적 구건결핵분지간균복소인자D기인(RpfD)진핵표체재체,위결핵분지간균복소인자DNA역묘적연구전정기출.방법 PCR확증복소인자D기인편단,극륭지PcDNA3.1(-)재체중,중조질립측서정학후,전염지CHO세포중.통과G418사선,RT-PCR검측극륭기인mRNA재진핵세포적표체,Western blot검측목적 단백적표체.결과 구건료PcDNA-RpfD표체재체,RT-PCR증실구건적재체능재CHO세포중표체RpfD기인mRNA,Western blot증실전염료재체적CHO능표체RpfD단백질.결론 성공구건PcDNA-RpfD진핵표체재체,전염세포CHO능표체RpfD단백질.
