华南农业大学学报
華南農業大學學報
화남농업대학학보
JOURNAL OF SOUTH CHINA AGRICULTURAL UNIVERSITY
2011年
1期
108-111
,共4页
EMA%PCR%副溶血弧菌%死活细胞
EMA%PCR%副溶血弧菌%死活細胞
EMA%PCR%부용혈호균%사활세포
将EMA(Ethidium monoazide)选择渗透性和PCR技术相结合,建立检验副溶血弧菌Vibrio parahaemolyticus死活细胞的EMA-PCR新方法.研究表明,25μg/mL或更高质量浓度的EMA可以抑制2.0×107 CFU/mL的副溶血弧菌死细胞DNA的扩增,未经EMA处理的对应样品PCR反应呈阳性;而用相同浓度EMA处理2.0×107 CFU/mL的活细胞菌悬液能扩增出目的产物.同时,对EMA处理中卤素灯的曝光时间进行优化,确定EMA处理的最佳曝光时间为5～10 min.结果证明,该方法是一种快速有效的检测死活细胞的新方法,能有效避免PCR检测假阳性结果的出现.
將EMA(Ethidium monoazide)選擇滲透性和PCR技術相結閤,建立檢驗副溶血弧菌Vibrio parahaemolyticus死活細胞的EMA-PCR新方法.研究錶明,25μg/mL或更高質量濃度的EMA可以抑製2.0×107 CFU/mL的副溶血弧菌死細胞DNA的擴增,未經EMA處理的對應樣品PCR反應呈暘性;而用相同濃度EMA處理2.0×107 CFU/mL的活細胞菌懸液能擴增齣目的產物.同時,對EMA處理中滷素燈的曝光時間進行優化,確定EMA處理的最佳曝光時間為5～10 min.結果證明,該方法是一種快速有效的檢測死活細胞的新方法,能有效避免PCR檢測假暘性結果的齣現.
장EMA(Ethidium monoazide)선택삼투성화PCR기술상결합,건립검험부용혈호균Vibrio parahaemolyticus사활세포적EMA-PCR신방법.연구표명,25μg/mL혹경고질량농도적EMA가이억제2.0×107 CFU/mL적부용혈호균사세포DNA적확증,미경EMA처리적대응양품PCR반응정양성;이용상동농도EMA처리2.0×107 CFU/mL적활세포균현액능확증출목적산물.동시,대EMA처리중서소등적폭광시간진행우화,학정EMA처리적최가폭광시간위5～10 min.결과증명,해방법시일충쾌속유효적검측사활세포적신방법,능유효피면PCR검측가양성결과적출현.
