中国实验血液学杂志
中國實驗血液學雜誌
중국실험혈액학잡지
JOURNAL OF EXPERIMENTAL HEMATOLOGY
2012年
3期
592-597
,共6页
刘泽法%汤华%宋飞雪%曾鹏云%岳玲玲%张连生
劉澤法%湯華%宋飛雪%曾鵬雲%嶽玲玲%張連生
류택법%탕화%송비설%증붕운%악령령%장련생
重组人p53腺病毒%树突状细胞%弥漫性大B细胞淋巴瘤
重組人p53腺病毒%樹突狀細胞%瀰漫性大B細胞淋巴瘤
중조인p53선병독%수돌상세포%미만성대B세포림파류
本研究旨在探讨重组人p53腺病毒转染淋巴瘤源性树突状细胞的抗肿瘤免疫效应.采集初诊弥漫性大B细胞淋巴瘤( DLBCL)患者肿大的淋巴结和外周血,分别分离单个核细胞,进行树突状细胞(DC)体外诱导培养,均分为实验组(rAd-p53-DC)、对照组(rAd-DC)和空白对照组.用重组人p53腺病毒(rAd-p53)转染2种来源的DC,流式细胞术检测DC免疫表型,Western blot鉴定P53蛋白的表达,ELISA法检测上清中的细胞因子IL-12的含量,用混合淋巴细胞反应(MLR)测定DC刺激同种异体淋巴细胞增殖能力,用乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测经rAd-p53转染的两种来源DC的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)反应.结果表明,实验组DC的表型(CD1a除外)CD83、CD80、CD86和HLA-DR表达均较对照组及空白对照组明显增高(P<0.05).实验组P53蛋白的表达上调,培养上清液中IL-12分泌水平较对照组及空白对照组明显增高(P<0.05).实验组明显刺激自体淋巴细胞增殖,且刺激能力随rAd-p53-DC与淋巴细胞比例的增加而升高.对照组及空白对照组也能刺激同种自体淋巴细胞增殖,但较实验组差(P<0.05).对靶细胞的细胞毒作用(CTL效应)检测显示,实验组介导同种异体的淋巴细胞杀伤率显著高于对照组及空白对照组(P<0.05),且淋巴结来源DC的CTL效应明显高于外周血来源DC(P <0.05).结论:rAd-p53-DC为基础的肿瘤疫苗有可能在解决淋巴瘤的微小残留病、DC免疫耐受等问题方面发挥作用.
本研究旨在探討重組人p53腺病毒轉染淋巴瘤源性樹突狀細胞的抗腫瘤免疫效應.採集初診瀰漫性大B細胞淋巴瘤( DLBCL)患者腫大的淋巴結和外週血,分彆分離單箇覈細胞,進行樹突狀細胞(DC)體外誘導培養,均分為實驗組(rAd-p53-DC)、對照組(rAd-DC)和空白對照組.用重組人p53腺病毒(rAd-p53)轉染2種來源的DC,流式細胞術檢測DC免疫錶型,Western blot鑒定P53蛋白的錶達,ELISA法檢測上清中的細胞因子IL-12的含量,用混閤淋巴細胞反應(MLR)測定DC刺激同種異體淋巴細胞增殖能力,用乳痠脫氫酶(LDH)釋放法檢測經rAd-p53轉染的兩種來源DC的細胞毒性T淋巴細胞(CTL)反應.結果錶明,實驗組DC的錶型(CD1a除外)CD83、CD80、CD86和HLA-DR錶達均較對照組及空白對照組明顯增高(P<0.05).實驗組P53蛋白的錶達上調,培養上清液中IL-12分泌水平較對照組及空白對照組明顯增高(P<0.05).實驗組明顯刺激自體淋巴細胞增殖,且刺激能力隨rAd-p53-DC與淋巴細胞比例的增加而升高.對照組及空白對照組也能刺激同種自體淋巴細胞增殖,但較實驗組差(P<0.05).對靶細胞的細胞毒作用(CTL效應)檢測顯示,實驗組介導同種異體的淋巴細胞殺傷率顯著高于對照組及空白對照組(P<0.05),且淋巴結來源DC的CTL效應明顯高于外週血來源DC(P <0.05).結論:rAd-p53-DC為基礎的腫瘤疫苗有可能在解決淋巴瘤的微小殘留病、DC免疫耐受等問題方麵髮揮作用.
본연구지재탐토중조인p53선병독전염림파류원성수돌상세포적항종류면역효응.채집초진미만성대B세포림파류( DLBCL)환자종대적림파결화외주혈,분별분리단개핵세포,진행수돌상세포(DC)체외유도배양,균분위실험조(rAd-p53-DC)、대조조(rAd-DC)화공백대조조.용중조인p53선병독(rAd-p53)전염2충래원적DC,류식세포술검측DC면역표형,Western blot감정P53단백적표체,ELISA법검측상청중적세포인자IL-12적함량,용혼합림파세포반응(MLR)측정DC자격동충이체림파세포증식능력,용유산탈경매(LDH)석방법검측경rAd-p53전염적량충래원DC적세포독성T림파세포(CTL)반응.결과표명,실험조DC적표형(CD1a제외)CD83、CD80、CD86화HLA-DR표체균교대조조급공백대조조명현증고(P<0.05).실험조P53단백적표체상조,배양상청액중IL-12분비수평교대조조급공백대조조명현증고(P<0.05).실험조명현자격자체림파세포증식,차자격능력수rAd-p53-DC여림파세포비례적증가이승고.대조조급공백대조조야능자격동충자체림파세포증식,단교실험조차(P<0.05).대파세포적세포독작용(CTL효응)검측현시,실험조개도동충이체적림파세포살상솔현저고우대조조급공백대조조(P<0.05),차림파결래원DC적CTL효응명현고우외주혈래원DC(P <0.05).결론:rAd-p53-DC위기출적종류역묘유가능재해결림파류적미소잔류병、DC면역내수등문제방면발휘작용.