农业生物技术学报
農業生物技術學報
농업생물기술학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL BIOTECHNOLOGY
2012年
6期
669-675
,共7页
余子全%罗辉%熊静%尹佳%胡胜标%丁学知%夏立秋
餘子全%囉輝%熊靜%尹佳%鬍勝標%丁學知%夏立鞦
여자전%라휘%웅정%윤가%호성표%정학지%하립추
坚强芽胞杆菌%根结线虫%毒力
堅彊芽胞桿菌%根結線蟲%毒力
견강아포간균%근결선충%독력
为筛选高效安全的杀虫资源,从海底淤泥中分离到一株对根结线虫(Meloidogyne spp.)高毒力的芽胞杆菌YBf-10,PCR扩增16S rRAN基因,经测序、序列比对分析和系统进化树构建,发现其与坚强芽胞杆菌(Bacillus firmus)Z1-7菌株16S rDNA同源性为99%,初步确定所分离的菌株为坚强芽胞杆菌.将该菌株培养至芽胞成熟,离心取上清,10倍稀释后进行生物测定,发现其对北方根结线虫二龄幼虫有很高的毒力.处理24h校正死亡率达到50%以上,72h达到100%.对根结线虫虫卵进行毒力测定表明,作用48 h后能显著抑制虫卵孵化达到80%以上.在培养过程中分不同时段取样,并用所取样品上清进行生物测定,发现从稳定期开始表现出了对北方根结线虫的毒力,在整个稳定期毒力持续增强,直到衰亡期后期,毒力达到最高,表明坚强芽胞杆菌所产生的杀线虫活性物质主要是在稳定期合成的.将发酵上清80℃处理30 min毒力无明显变化,通过饱和硫酸铵沉淀上清中蛋白,该蛋白对线虫无明显毒力,但是去蛋白后的上清对线虫仍然具有与未经处理上清相似的杀线虫活性,表明坚强芽胞杆菌产生的杀线虫活性物质是一种非蛋白类的小分子化合物.研究结果提示,本研究所分离的坚强芽胞杆菌在稳定期能够大量合成对线虫具有毒杀活性的小分子化合物,对根结线虫表现出极高毒力,为利用该菌株开发植物寄生线虫生防制剂提供了杀虫资源.
為篩選高效安全的殺蟲資源,從海底淤泥中分離到一株對根結線蟲(Meloidogyne spp.)高毒力的芽胞桿菌YBf-10,PCR擴增16S rRAN基因,經測序、序列比對分析和繫統進化樹構建,髮現其與堅彊芽胞桿菌(Bacillus firmus)Z1-7菌株16S rDNA同源性為99%,初步確定所分離的菌株為堅彊芽胞桿菌.將該菌株培養至芽胞成熟,離心取上清,10倍稀釋後進行生物測定,髮現其對北方根結線蟲二齡幼蟲有很高的毒力.處理24h校正死亡率達到50%以上,72h達到100%.對根結線蟲蟲卵進行毒力測定錶明,作用48 h後能顯著抑製蟲卵孵化達到80%以上.在培養過程中分不同時段取樣,併用所取樣品上清進行生物測定,髮現從穩定期開始錶現齣瞭對北方根結線蟲的毒力,在整箇穩定期毒力持續增彊,直到衰亡期後期,毒力達到最高,錶明堅彊芽胞桿菌所產生的殺線蟲活性物質主要是在穩定期閤成的.將髮酵上清80℃處理30 min毒力無明顯變化,通過飽和硫痠銨沉澱上清中蛋白,該蛋白對線蟲無明顯毒力,但是去蛋白後的上清對線蟲仍然具有與未經處理上清相似的殺線蟲活性,錶明堅彊芽胞桿菌產生的殺線蟲活性物質是一種非蛋白類的小分子化閤物.研究結果提示,本研究所分離的堅彊芽胞桿菌在穩定期能夠大量閤成對線蟲具有毒殺活性的小分子化閤物,對根結線蟲錶現齣極高毒力,為利用該菌株開髮植物寄生線蟲生防製劑提供瞭殺蟲資源.
위사선고효안전적살충자원,종해저어니중분리도일주대근결선충(Meloidogyne spp.)고독력적아포간균YBf-10,PCR확증16S rRAN기인,경측서、서렬비대분석화계통진화수구건,발현기여견강아포간균(Bacillus firmus)Z1-7균주16S rDNA동원성위99%,초보학정소분리적균주위견강아포간균.장해균주배양지아포성숙,리심취상청,10배희석후진행생물측정,발현기대북방근결선충이령유충유흔고적독력.처리24h교정사망솔체도50%이상,72h체도100%.대근결선충충란진행독력측정표명,작용48 h후능현저억제충란부화체도80%이상.재배양과정중분불동시단취양,병용소취양품상청진행생물측정,발현종은정기개시표현출료대북방근결선충적독력,재정개은정기독력지속증강,직도쇠망기후기,독력체도최고,표명견강아포간균소산생적살선충활성물질주요시재은정기합성적.장발효상청80℃처리30 min독력무명현변화,통과포화류산안침정상청중단백,해단백대선충무명현독력,단시거단백후적상청대선충잉연구유여미경처리상청상사적살선충활성,표명견강아포간균산생적살선충활성물질시일충비단백류적소분자화합물.연구결과제시,본연구소분리적견강아포간균재은정기능구대량합성대선충구유독살활성적소분자화합물,대근결선충표현출겁고독력,위이용해균주개발식물기생선충생방제제제공료살충자원.