癌变·畸变·突变
癌變·畸變·突變
암변·기변·돌변
CARCINOGENSES,TERATOGENSIS AND MUTAGENESIS
2012年
3期
166-171
,共6页
朱敏%张庆英%罗家逸%张东红%赵治国%易德青
硃敏%張慶英%囉傢逸%張東紅%趙治國%易德青
주민%장경영%라가일%장동홍%조치국%역덕청
乙酸铅%乙酸镉%人胎盘绒毛癌细胞%S100钙结合蛋白
乙痠鉛%乙痠鎘%人胎盤絨毛癌細胞%S100鈣結閤蛋白
을산연%을산력%인태반융모암세포%S100개결합단백
目的:探讨重金属铅(Pb)和镉(Cd)对人胎盘绒毛癌细胞(JAR)中一组S100钙结合蛋白家族成员mRNA表达的影响.方法:采用四甲基噻唑蓝(MTT)实验分别检测乙酸铅(PbAc)和乙酸镉(CdAc)对JAR增殖活力的影响.再进一步采用小于半数致死量的不同浓度的PbAc和CdAc分别染毒JAR细胞24h和48 h,运用半定量RT-PCR检测各染毒组与对照组[金属硫蛋白(MT)为参照,β-actin为内参]S100钙结合蛋白家族成员mRNA的表达水平.结果:PbAc (2.5 ～ 20μmol/L)和CdAc (2.5～ 10 μmol/L)染毒24h后对JAR细胞的相对存活率与染毒浓度呈剂量效应关系,且呈线性负相关(r依次为-0.992 4和-0.995 5,P均＜0.05),半数致死浓度PbAc为23.15μmol/L,CdAc为8.30μmol/L.半定量RT-PCR检测9个钙结合蛋白S100家族成员,仅发现S100A10、S100A11、S100A14和S100P有明显表达,其余的S100成员表达较弱或未能检出.染毒24h和48 h后,与对照组比较,S100A10和S100A11mRNA的表达未发生明显变化,但S100A14 mRNA的表达(除10μmol/L PbAc染毒24 h外)明显上调(P＜0.05或P＜0.01).S100P的表达经2.5和5μmol/L PbAc染毒24 h后明显上调(P＜0.05或P＜0.01),但随PbAc浓度增高表达有降低的趋势.而经CdAc染毒24h后各实验组S100P的表达均明显上调(P＜0.05或P＜0.01)；经染毒48 h后的表达进一步增加,但与对照组相比差异无统计学意义(P＞0.05).S100P的表达与MT对照的结果相类似.结论:PbAc或CdAc染毒JAR细胞可引起S100A14和S100P mRNA的表达发生明显的变化,其中S100P的变化规律与MT的表现类似,推测这两种钙结合蛋白在重金属毒作用过程中有参与保护细胞的重要作用,可作为细胞应激的分子生物指标.
目的:探討重金屬鉛(Pb)和鎘(Cd)對人胎盤絨毛癌細胞(JAR)中一組S100鈣結閤蛋白傢族成員mRNA錶達的影響.方法:採用四甲基噻唑藍(MTT)實驗分彆檢測乙痠鉛(PbAc)和乙痠鎘(CdAc)對JAR增殖活力的影響.再進一步採用小于半數緻死量的不同濃度的PbAc和CdAc分彆染毒JAR細胞24h和48 h,運用半定量RT-PCR檢測各染毒組與對照組[金屬硫蛋白(MT)為參照,β-actin為內參]S100鈣結閤蛋白傢族成員mRNA的錶達水平.結果:PbAc (2.5 ～ 20μmol/L)和CdAc (2.5～ 10 μmol/L)染毒24h後對JAR細胞的相對存活率與染毒濃度呈劑量效應關繫,且呈線性負相關(r依次為-0.992 4和-0.995 5,P均＜0.05),半數緻死濃度PbAc為23.15μmol/L,CdAc為8.30μmol/L.半定量RT-PCR檢測9箇鈣結閤蛋白S100傢族成員,僅髮現S100A10、S100A11、S100A14和S100P有明顯錶達,其餘的S100成員錶達較弱或未能檢齣.染毒24h和48 h後,與對照組比較,S100A10和S100A11mRNA的錶達未髮生明顯變化,但S100A14 mRNA的錶達(除10μmol/L PbAc染毒24 h外)明顯上調(P＜0.05或P＜0.01).S100P的錶達經2.5和5μmol/L PbAc染毒24 h後明顯上調(P＜0.05或P＜0.01),但隨PbAc濃度增高錶達有降低的趨勢.而經CdAc染毒24h後各實驗組S100P的錶達均明顯上調(P＜0.05或P＜0.01)；經染毒48 h後的錶達進一步增加,但與對照組相比差異無統計學意義(P＞0.05).S100P的錶達與MT對照的結果相類似.結論:PbAc或CdAc染毒JAR細胞可引起S100A14和S100P mRNA的錶達髮生明顯的變化,其中S100P的變化規律與MT的錶現類似,推測這兩種鈣結閤蛋白在重金屬毒作用過程中有參與保護細胞的重要作用,可作為細胞應激的分子生物指標.
목적:탐토중금속연(Pb)화력(Cd)대인태반융모암세포(JAR)중일조S100개결합단백가족성원mRNA표체적영향.방법:채용사갑기새서람(MTT)실험분별검측을산연(PbAc)화을산력(CdAc)대JAR증식활력적영향.재진일보채용소우반수치사량적불동농도적PbAc화CdAc분별염독JAR세포24h화48 h,운용반정량RT-PCR검측각염독조여대조조[금속류단백(MT)위삼조,β-actin위내삼]S100개결합단백가족성원mRNA적표체수평.결과:PbAc (2.5 ～ 20μmol/L)화CdAc (2.5～ 10 μmol/L)염독24h후대JAR세포적상대존활솔여염독농도정제량효응관계,차정선성부상관(r의차위-0.992 4화-0.995 5,P균＜0.05),반수치사농도PbAc위23.15μmol/L,CdAc위8.30μmol/L.반정량RT-PCR검측9개개결합단백S100가족성원,부발현S100A10、S100A11、S100A14화S100P유명현표체,기여적S100성원표체교약혹미능검출.염독24h화48 h후,여대조조비교,S100A10화S100A11mRNA적표체미발생명현변화,단S100A14 mRNA적표체(제10μmol/L PbAc염독24 h외)명현상조(P＜0.05혹P＜0.01).S100P적표체경2.5화5μmol/L PbAc염독24 h후명현상조(P＜0.05혹P＜0.01),단수PbAc농도증고표체유강저적추세.이경CdAc염독24h후각실험조S100P적표체균명현상조(P＜0.05혹P＜0.01)；경염독48 h후적표체진일보증가,단여대조조상비차이무통계학의의(P＞0.05).S100P적표체여MT대조적결과상유사.결론:PbAc혹CdAc염독JAR세포가인기S100A14화S100P mRNA적표체발생명현적변화,기중S100P적변화규률여MT적표현유사,추측저량충개결합단백재중금속독작용과정중유삼여보호세포적중요작용,가작위세포응격적분자생물지표.
