基因组学与应用生物学
基因組學與應用生物學
기인조학여응용생물학
GENOMICS AND APPLIED BIOLOGY
2012年
4期
333-340
,共8页
薛番艳%苏辉昭%刘兴艳%梁伟%李磊%李瑞芳%陆光涛
薛番豔%囌輝昭%劉興豔%樑偉%李磊%李瑞芳%陸光濤
설번염%소휘소%류흥염%량위%리뢰%리서방%륙광도
十字花科黑腐病菌%转录调控因子%HpaR1%纤维素酶
十字花科黑腐病菌%轉錄調控因子%HpaR1%纖維素酶
십자화과흑부병균%전록조공인자%HpaR1%섬유소매
十字花科黑腐病菌(Xcc8004)中的一个转录调控因子XC_2736 (HpaR1)在致病过程中具有重要的作用.前期研究发现该转录调控因子可能调控胞外纤维素酶的合成.为了解HpaR1对纤维素酶的转录调控机理,本研究对HpaR1进行原核表达纯化,并与488 bp的包含XC_0639的启动子区DNA片段进行凝胶电泳迁移率试验,发现HpaR1与XC_0639启动子可以发生结合.将488 bp的XC_0639的启动子DNA片段与报告基因gus融合,构建XC_0639的报告质粒pGUS0639r,分别导入野生型8004菌株和缺失突变体DM2736中,分析发现在突变体背景下GUS的表达水平比野生型背景明显降低.表明HpaR1正调控XC_0639的表达.构建XC_0639的极性整合突变体PK0639,检测发现PK0639几乎丧失胞外纤维素酶的活力;通过功能反式互补构建的互补菌株CPK0639可以恢复纤维素酶活性.研究结果表明HpaR1通过调控纤维素酶基因XC_0639的表达来调控细胞的纤维素酶活性.本研究为更深入地了解HpaR1如何调控细菌生理生化功能奠定了基础.
十字花科黑腐病菌(Xcc8004)中的一箇轉錄調控因子XC_2736 (HpaR1)在緻病過程中具有重要的作用.前期研究髮現該轉錄調控因子可能調控胞外纖維素酶的閤成.為瞭解HpaR1對纖維素酶的轉錄調控機理,本研究對HpaR1進行原覈錶達純化,併與488 bp的包含XC_0639的啟動子區DNA片段進行凝膠電泳遷移率試驗,髮現HpaR1與XC_0639啟動子可以髮生結閤.將488 bp的XC_0639的啟動子DNA片段與報告基因gus融閤,構建XC_0639的報告質粒pGUS0639r,分彆導入野生型8004菌株和缺失突變體DM2736中,分析髮現在突變體揹景下GUS的錶達水平比野生型揹景明顯降低.錶明HpaR1正調控XC_0639的錶達.構建XC_0639的極性整閤突變體PK0639,檢測髮現PK0639幾乎喪失胞外纖維素酶的活力;通過功能反式互補構建的互補菌株CPK0639可以恢複纖維素酶活性.研究結果錶明HpaR1通過調控纖維素酶基因XC_0639的錶達來調控細胞的纖維素酶活性.本研究為更深入地瞭解HpaR1如何調控細菌生理生化功能奠定瞭基礎.
십자화과흑부병균(Xcc8004)중적일개전록조공인자XC_2736 (HpaR1)재치병과정중구유중요적작용.전기연구발현해전록조공인자가능조공포외섬유소매적합성.위료해HpaR1대섬유소매적전록조공궤리,본연구대HpaR1진행원핵표체순화,병여488 bp적포함XC_0639적계동자구DNA편단진행응효전영천이솔시험,발현HpaR1여XC_0639계동자가이발생결합.장488 bp적XC_0639적계동자DNA편단여보고기인gus융합,구건XC_0639적보고질립pGUS0639r,분별도입야생형8004균주화결실돌변체DM2736중,분석발현재돌변체배경하GUS적표체수평비야생형배경명현강저.표명HpaR1정조공XC_0639적표체.구건XC_0639적겁성정합돌변체PK0639,검측발현PK0639궤호상실포외섬유소매적활력;통과공능반식호보구건적호보균주CPK0639가이회복섬유소매활성.연구결과표명HpaR1통과조공섬유소매기인XC_0639적표체래조공세포적섬유소매활성.본연구위경심입지료해HpaR1여하조공세균생리생화공능전정료기출.
