复旦学报（医学版）
複旦學報（醫學版）
복단학보（의학판）
FUDAN UNIVERSITY JOURNAL OF MEDICAL SCIENCES
2012年
3期
277-282
,共6页
揭志军%冯净净%宋志刚%张悦%郭雪君
揭誌軍%馮淨淨%宋誌剛%張悅%郭雪君
게지군%풍정정%송지강%장열%곽설군
呼吸道合胞病毒%骨髓树突状细胞%干扰素%信号通路%核转移
呼吸道閤胞病毒%骨髓樹突狀細胞%榦擾素%信號通路%覈轉移
호흡도합포병독%골수수돌상세포%간우소%신호통로%핵전이
目的 研究呼吸合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)感染小鼠骨髓树突状细胞(bone marrow derived dendritic cells,BMDCs)后,对Ⅰ型和Ⅱ型干扰素(interferon,IFN)诱导的JAK/ST AT通路蛋白活化后核转移的影响.方法 从BALB/c小鼠的长骨中分离骨髓细胞,经过培养和刺激后得到BMDCs.将BMDCs接种于带小室的玻片上,以感染复数(multiplicity of infection,MOI)为1的RSV感染细胞,并设紫外线灭活的RSV(UV-RSV)和培养液(media)刺激为对照.在培养24 h后,分别用100IU/mL的IFN-β刺激30min或0.64pmol/L的IFN-γ刺激45min,然后进行免疫荧光染色.在荧光显微镜下计数STAT蛋白核转移阳性细胞的百分比,比较各组间的差异.结果 在未感染的BMDCs中,STAT1和STAT2蛋白主要存在于细胞质中,当用IFN-β刺激BMDCs后可见到明显的STAT1和STAT2蛋白向细胞核转移,核转移阳性细胞百分比分别为89.0％±4.6％和83.7％±5.1％,与未处理组(NT组)相比有明显差异(P＜0.0l).而 RSV感染后,发现STAT1和STAT2蛋白核转移阳性细胞数较IFN-β刺激组明显减少(P＜0.01),说明RSV感染可以抑制IFN-β诱导的STAT1和STAT2蛋白的核转移.而应用UV-RSV感染后与IFN-β刺激组相比,STAT1和STAT2蛋白核转移阳性细胞数却未见明显减少(P＞0.05).用IFN-γ刺激BMDCs后也可见到明显的STAT1蛋白向细胞核转移(阳性细胞为85.3％±6.4％)；而RSV感染后与IFN-γ刺激组相比,STAT1核转移阳性细胞数(79.3％±4.9％)却未见明显减少(P＞0.05).结论 RSV感染BMDCs后,能特异性地抑制Ⅰ型IFN诱导的STAT1和STAT2蛋白的核转移,而对Ⅱ型IFN诱导的STAT1蛋白的核转移却没有影响.
目的 研究呼吸閤胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)感染小鼠骨髓樹突狀細胞(bone marrow derived dendritic cells,BMDCs)後,對Ⅰ型和Ⅱ型榦擾素(interferon,IFN)誘導的JAK/ST AT通路蛋白活化後覈轉移的影響.方法 從BALB/c小鼠的長骨中分離骨髓細胞,經過培養和刺激後得到BMDCs.將BMDCs接種于帶小室的玻片上,以感染複數(multiplicity of infection,MOI)為1的RSV感染細胞,併設紫外線滅活的RSV(UV-RSV)和培養液(media)刺激為對照.在培養24 h後,分彆用100IU/mL的IFN-β刺激30min或0.64pmol/L的IFN-γ刺激45min,然後進行免疫熒光染色.在熒光顯微鏡下計數STAT蛋白覈轉移暘性細胞的百分比,比較各組間的差異.結果 在未感染的BMDCs中,STAT1和STAT2蛋白主要存在于細胞質中,噹用IFN-β刺激BMDCs後可見到明顯的STAT1和STAT2蛋白嚮細胞覈轉移,覈轉移暘性細胞百分比分彆為89.0％±4.6％和83.7％±5.1％,與未處理組(NT組)相比有明顯差異(P＜0.0l).而 RSV感染後,髮現STAT1和STAT2蛋白覈轉移暘性細胞數較IFN-β刺激組明顯減少(P＜0.01),說明RSV感染可以抑製IFN-β誘導的STAT1和STAT2蛋白的覈轉移.而應用UV-RSV感染後與IFN-β刺激組相比,STAT1和STAT2蛋白覈轉移暘性細胞數卻未見明顯減少(P＞0.05).用IFN-γ刺激BMDCs後也可見到明顯的STAT1蛋白嚮細胞覈轉移(暘性細胞為85.3％±6.4％)；而RSV感染後與IFN-γ刺激組相比,STAT1覈轉移暘性細胞數(79.3％±4.9％)卻未見明顯減少(P＞0.05).結論 RSV感染BMDCs後,能特異性地抑製Ⅰ型IFN誘導的STAT1和STAT2蛋白的覈轉移,而對Ⅱ型IFN誘導的STAT1蛋白的覈轉移卻沒有影響.
목적 연구호흡합포병독(respiratory syncytial virus,RSV)감염소서골수수돌상세포(bone marrow derived dendritic cells,BMDCs)후,대Ⅰ형화Ⅱ형간우소(interferon,IFN)유도적JAK/ST AT통로단백활화후핵전이적영향.방법 종BALB/c소서적장골중분리골수세포,경과배양화자격후득도BMDCs.장BMDCs접충우대소실적파편상,이감염복수(multiplicity of infection,MOI)위1적RSV감염세포,병설자외선멸활적RSV(UV-RSV)화배양액(media)자격위대조.재배양24 h후,분별용100IU/mL적IFN-β자격30min혹0.64pmol/L적IFN-γ자격45min,연후진행면역형광염색.재형광현미경하계수STAT단백핵전이양성세포적백분비,비교각조간적차이.결과 재미감염적BMDCs중,STAT1화STAT2단백주요존재우세포질중,당용IFN-β자격BMDCs후가견도명현적STAT1화STAT2단백향세포핵전이,핵전이양성세포백분비분별위89.0％±4.6％화83.7％±5.1％,여미처리조(NT조)상비유명현차이(P＜0.0l).이 RSV감염후,발현STAT1화STAT2단백핵전이양성세포수교IFN-β자격조명현감소(P＜0.01),설명RSV감염가이억제IFN-β유도적STAT1화STAT2단백적핵전이.이응용UV-RSV감염후여IFN-β자격조상비,STAT1화STAT2단백핵전이양성세포수각미견명현감소(P＞0.05).용IFN-γ자격BMDCs후야가견도명현적STAT1단백향세포핵전이(양성세포위85.3％±6.4％)；이RSV감염후여IFN-γ자격조상비,STAT1핵전이양성세포수(79.3％±4.9％)각미견명현감소(P＞0.05).결론 RSV감염BMDCs후,능특이성지억제Ⅰ형IFN유도적STAT1화STAT2단백적핵전이,이대Ⅱ형IFN유도적STAT1단백적핵전이각몰유영향.
