高校化学工程学报
高校化學工程學報
고교화학공정학보
JOURNAL OF CHEMICAL ENGINEERING OF CHINESE UNIVERSITIES
2012年
4期
692-697
,共6页
张敏华%韦柳静%祝坤%花强
張敏華%韋柳靜%祝坤%花彊
장민화%위류정%축곤%화강
氧化葡萄糖酸杆菌%葡萄糖培养基优化%2,3-丁二醇%乙偶姻
氧化葡萄糖痠桿菌%葡萄糖培養基優化%2,3-丁二醇%乙偶姻
양화포도당산간균%포도당배양기우화%2,3-정이순%을우인
在前期的工作中对氧化葡萄糖酸杆菌的膜结合葡萄糖脱氢酶基因(gdh)进行了敲除,已得到一株工程菌株GDHK[1],去除了由于该酶的存在而导致葡萄糖培养基容易酸化的途径,从而促进细胞在葡萄糖上的生长.为了更有效地利用葡萄糖这一相对廉价的碳源、降低氧化葡萄糖酸杆菌的生物催化成本,首先用正交实验方法对GDHK的葡萄糖培养基优化,优化结果显示最优的葡萄糖培养基配方为:葡萄糖40 g·L-1,酵母粉20 g·L-1,硫酸铵0.5g·L-1,磷酸二氢钾4g·L-1,七水硫酸镁0.5g·L-1.用优化好的培养基配方测定GDHK的生长,最终菌浓从0.6g·L-1提高到0.75 g·L-1,提高了25%.其次,实验还探讨了原始菌621H和敲除菌GDHK分别在葡萄糖、山梨醇、甘露醇和甘油这4种碳源培养基上培养所得的静息细胞催化2,3-丁二醇生成乙偶姻的影响.实验表明,在葡萄糖培养基上生长的GDHK得到的静息细胞催化效果最好,反应进行到12h,乙偶姻的转化效率已达到80.00%,浓度为3130 g·L.,是同样在葡萄糖上生长的原始菌细胞催化能力的13倍,同时也是其他培养基的1.2~1.5倍,而葡萄糖的用量也只有传统的其他碳源用量的一半,这些都说明用葡萄糖代替其他多元醇,作为工业上培养氧化葡萄糖酸杆菌催化乙偶姻生产的碳源,降低生产成本的策略具有较好的应用前景.
在前期的工作中對氧化葡萄糖痠桿菌的膜結閤葡萄糖脫氫酶基因(gdh)進行瞭敲除,已得到一株工程菌株GDHK[1],去除瞭由于該酶的存在而導緻葡萄糖培養基容易痠化的途徑,從而促進細胞在葡萄糖上的生長.為瞭更有效地利用葡萄糖這一相對廉價的碳源、降低氧化葡萄糖痠桿菌的生物催化成本,首先用正交實驗方法對GDHK的葡萄糖培養基優化,優化結果顯示最優的葡萄糖培養基配方為:葡萄糖40 g·L-1,酵母粉20 g·L-1,硫痠銨0.5g·L-1,燐痠二氫鉀4g·L-1,七水硫痠鎂0.5g·L-1.用優化好的培養基配方測定GDHK的生長,最終菌濃從0.6g·L-1提高到0.75 g·L-1,提高瞭25%.其次,實驗還探討瞭原始菌621H和敲除菌GDHK分彆在葡萄糖、山梨醇、甘露醇和甘油這4種碳源培養基上培養所得的靜息細胞催化2,3-丁二醇生成乙偶姻的影響.實驗錶明,在葡萄糖培養基上生長的GDHK得到的靜息細胞催化效果最好,反應進行到12h,乙偶姻的轉化效率已達到80.00%,濃度為3130 g·L.,是同樣在葡萄糖上生長的原始菌細胞催化能力的13倍,同時也是其他培養基的1.2~1.5倍,而葡萄糖的用量也隻有傳統的其他碳源用量的一半,這些都說明用葡萄糖代替其他多元醇,作為工業上培養氧化葡萄糖痠桿菌催化乙偶姻生產的碳源,降低生產成本的策略具有較好的應用前景.
재전기적공작중대양화포도당산간균적막결합포도당탈경매기인(gdh)진행료고제,이득도일주공정균주GDHK[1],거제료유우해매적존재이도치포도당배양기용역산화적도경,종이촉진세포재포도당상적생장.위료경유효지이용포도당저일상대렴개적탄원、강저양화포도당산간균적생물최화성본,수선용정교실험방법대GDHK적포도당배양기우화,우화결과현시최우적포도당배양기배방위:포도당40 g·L-1,효모분20 g·L-1,류산안0.5g·L-1,린산이경갑4g·L-1,칠수류산미0.5g·L-1.용우화호적배양기배방측정GDHK적생장,최종균농종0.6g·L-1제고도0.75 g·L-1,제고료25%.기차,실험환탐토료원시균621H화고제균GDHK분별재포도당、산리순、감로순화감유저4충탄원배양기상배양소득적정식세포최화2,3-정이순생성을우인적영향.실험표명,재포도당배양기상생장적GDHK득도적정식세포최화효과최호,반응진행도12h,을우인적전화효솔이체도80.00%,농도위3130 g·L.,시동양재포도당상생장적원시균세포최화능력적13배,동시야시기타배양기적1.2~1.5배,이포도당적용량야지유전통적기타탄원용량적일반,저사도설명용포도당대체기타다원순,작위공업상배양양화포도당산간균최화을우인생산적탄원,강저생산성본적책략구유교호적응용전경.