东南大学学报（医学版）
東南大學學報（醫學版）
동남대학학보（의학판）
JOURNAL OF SOUTHEAST UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCE EDITION)
2007年
3期
220-224
,共5页
顾林%文良柱%吴国球%徐寒梅%沈子龙
顧林%文良柱%吳國毬%徐寒梅%瀋子龍
고림%문량주%오국구%서한매%침자룡
thanatin%突变体%大肠杆菌%融合蛋白%纯化%表达%药敏试验
thanatin%突變體%大腸桿菌%融閤蛋白%純化%錶達%藥敏試驗
thanatin%돌변체%대장간균%융합단백%순화%표체%약민시험
目的:在大肠杆菌中克隆表达thanatin突变体(Th-T)蛋白并纯化. 方法:PCR合成Th-T基因并克隆到pET32a载体的BamHⅠ和XhoⅠ酶切位点之间,构建Th-T原核表达载体(pET32a-Th-T)并转化到大肠杆菌BL21融合表达,通过正交实验优化表达条件,His-Bind介质纯化.考察经酶切纯化后的重组Th-T对4种供试菌的最低抑制浓度.结果:菌体在LB培养基(pH 6.5)培养4.5 h,IPTG 0.4 mmol·L-1诱导7 h,Th-T融合蛋白大量可溶性表达,经药敏试验证明纯化的重组Th-T具有预期的抗菌活性.结论:本研究为通过大肠杆菌体系表达重组Th-T抗菌药物奠定了基础.
目的:在大腸桿菌中剋隆錶達thanatin突變體(Th-T)蛋白併純化. 方法:PCR閤成Th-T基因併剋隆到pET32a載體的BamHⅠ和XhoⅠ酶切位點之間,構建Th-T原覈錶達載體(pET32a-Th-T)併轉化到大腸桿菌BL21融閤錶達,通過正交實驗優化錶達條件,His-Bind介質純化.攷察經酶切純化後的重組Th-T對4種供試菌的最低抑製濃度.結果:菌體在LB培養基(pH 6.5)培養4.5 h,IPTG 0.4 mmol·L-1誘導7 h,Th-T融閤蛋白大量可溶性錶達,經藥敏試驗證明純化的重組Th-T具有預期的抗菌活性.結論:本研究為通過大腸桿菌體繫錶達重組Th-T抗菌藥物奠定瞭基礎.
목적:재대장간균중극륭표체thanatin돌변체(Th-T)단백병순화. 방법:PCR합성Th-T기인병극륭도pET32a재체적BamHⅠ화XhoⅠ매절위점지간,구건Th-T원핵표체재체(pET32a-Th-T)병전화도대장간균BL21융합표체,통과정교실험우화표체조건,His-Bind개질순화.고찰경매절순화후적중조Th-T대4충공시균적최저억제농도.결과:균체재LB배양기(pH 6.5)배양4.5 h,IPTG 0.4 mmol·L-1유도7 h,Th-T융합단백대량가용성표체,경약민시험증명순화적중조Th-T구유예기적항균활성.결론:본연구위통과대장간균체계표체중조Th-T항균약물전정료기출.
