中国修复重建外科杂志
中國脩複重建外科雜誌
중국수복중건외과잡지
CHINESE JOURNAL OF REPARATIVE AND RECONSTRUCTIVE SURGERY
2008年
6期
732-736
,共5页
孙磊%张柏青%陈磊%陶剑锋%江健%孟国林%窦榆生%徐建强%刘丹平%胡蕴玉
孫磊%張柏青%陳磊%陶劍鋒%江健%孟國林%竇榆生%徐建彊%劉丹平%鬍蘊玉
손뢰%장백청%진뢰%도검봉%강건%맹국림%두유생%서건강%류단평%호온옥
组织工程骨%海藻酸钠凝胶%异种骨%载体%体内成骨
組織工程骨%海藻痠鈉凝膠%異種骨%載體%體內成骨
조직공정골%해조산납응효%이충골%재체%체내성골
目的 采用海藻酸钠凝胶(sodium alginate,A)复合异种骨的方法,构建骨组织工程载体,观察载体中细胞的生物性能及体内成骨能力,为构建效率更高的骨组织工程载体提供实验依据.方法 取2只2周龄新西兰兔的骨髓,以rhBMP-2(1×10-8mol/L)诱导培养BMSCs.取诱导后第2代BMSCs接种于1%(V/W)A中,培养4 d HE染色观察凝胶中细胞形态.将第2代BMSCs分为单纯DMEM凝胶组和含1%A的DMEM凝胶组,培养7 d后行BMP-2免疫组织化学染色观察.第2代BMSCs与2%(V/W)A的DMEM凝胶混合,负压下复合去抗原牛松质骨(xenograftbone,X),4 d后扫描电镜观察细胞生长情况.取24只裸鼠,随机分为2组(n=12),于两侧股部肌袋中分别植入BMSCs-A-X复合体作为实验组,BMSCs-X复合体作为对照组.于术后2、4周后组织学观察复合体成骨情况,图像分析系统分析各组成骨或软骨的面积百分比.结果 HE 染色观察,培养4 dA中BMSCs细胞形态饱满,细胞悬浮于凝胶中,可见细胞分裂和核分裂相.单纯DMEM凝胶组和含1%A的DMEM凝胶组免疫组织化学观察,细胞分裂增殖正常,伸出多种形态的突起,胞核大,核仁清晰.单纯DMEM凝胶组BMP-2表达阳性率为44.10%4±3.02%;含1%A的DMEM凝胶组为42.40%±4.83%,差异无统计学意义(P>0.05).扫描电镜观察:A均匀复合于X微孔中,不同平面均有细胞生长.植入裸鼠体内2周后,实验组及对照组中均有软骨和骨组织形成;实验组软骨面积百分比为7.31%±0.32%,骨为516%±0.24%;对照组软骨为2.31%±0.21%,骨为2.16%±0.22%;两组差异有统计学意义(P<0.05).术后4周,两组软骨和新生骨小梁及骨髓组织较2周时增多;实验组软骨面积百分比为9.31%±0.31%,骨为7.26%±0.26%;对照组软骨为3.31%±0.26%,骨为2.26%±0.28%;两组差异有统计学意义(P<0.05).术后2、4周同组间比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 以A-X构建骨组织工程载体,符合组织工程载体的超结构原理,最大限度地承载细胞,生物性能好,对BMSCs增殖和成骨表型及相关的生物性能无不良影响,在体内成骨效率较高.
目的 採用海藻痠鈉凝膠(sodium alginate,A)複閤異種骨的方法,構建骨組織工程載體,觀察載體中細胞的生物性能及體內成骨能力,為構建效率更高的骨組織工程載體提供實驗依據.方法 取2隻2週齡新西蘭兔的骨髓,以rhBMP-2(1×10-8mol/L)誘導培養BMSCs.取誘導後第2代BMSCs接種于1%(V/W)A中,培養4 d HE染色觀察凝膠中細胞形態.將第2代BMSCs分為單純DMEM凝膠組和含1%A的DMEM凝膠組,培養7 d後行BMP-2免疫組織化學染色觀察.第2代BMSCs與2%(V/W)A的DMEM凝膠混閤,負壓下複閤去抗原牛鬆質骨(xenograftbone,X),4 d後掃描電鏡觀察細胞生長情況.取24隻裸鼠,隨機分為2組(n=12),于兩側股部肌袋中分彆植入BMSCs-A-X複閤體作為實驗組,BMSCs-X複閤體作為對照組.于術後2、4週後組織學觀察複閤體成骨情況,圖像分析繫統分析各組成骨或軟骨的麵積百分比.結果 HE 染色觀察,培養4 dA中BMSCs細胞形態飽滿,細胞懸浮于凝膠中,可見細胞分裂和覈分裂相.單純DMEM凝膠組和含1%A的DMEM凝膠組免疫組織化學觀察,細胞分裂增殖正常,伸齣多種形態的突起,胞覈大,覈仁清晰.單純DMEM凝膠組BMP-2錶達暘性率為44.10%4±3.02%;含1%A的DMEM凝膠組為42.40%±4.83%,差異無統計學意義(P>0.05).掃描電鏡觀察:A均勻複閤于X微孔中,不同平麵均有細胞生長.植入裸鼠體內2週後,實驗組及對照組中均有軟骨和骨組織形成;實驗組軟骨麵積百分比為7.31%±0.32%,骨為516%±0.24%;對照組軟骨為2.31%±0.21%,骨為2.16%±0.22%;兩組差異有統計學意義(P<0.05).術後4週,兩組軟骨和新生骨小樑及骨髓組織較2週時增多;實驗組軟骨麵積百分比為9.31%±0.31%,骨為7.26%±0.26%;對照組軟骨為3.31%±0.26%,骨為2.26%±0.28%;兩組差異有統計學意義(P<0.05).術後2、4週同組間比較差異有統計學意義(P<0.05).結論 以A-X構建骨組織工程載體,符閤組織工程載體的超結構原理,最大限度地承載細胞,生物性能好,對BMSCs增殖和成骨錶型及相關的生物性能無不良影響,在體內成骨效率較高.
목적 채용해조산납응효(sodium alginate,A)복합이충골적방법,구건골조직공정재체,관찰재체중세포적생물성능급체내성골능력,위구건효솔경고적골조직공정재체제공실험의거.방법 취2지2주령신서란토적골수,이rhBMP-2(1×10-8mol/L)유도배양BMSCs.취유도후제2대BMSCs접충우1%(V/W)A중,배양4 d HE염색관찰응효중세포형태.장제2대BMSCs분위단순DMEM응효조화함1%A적DMEM응효조,배양7 d후행BMP-2면역조직화학염색관찰.제2대BMSCs여2%(V/W)A적DMEM응효혼합,부압하복합거항원우송질골(xenograftbone,X),4 d후소묘전경관찰세포생장정황.취24지라서,수궤분위2조(n=12),우량측고부기대중분별식입BMSCs-A-X복합체작위실험조,BMSCs-X복합체작위대조조.우술후2、4주후조직학관찰복합체성골정황,도상분석계통분석각조성골혹연골적면적백분비.결과 HE 염색관찰,배양4 dA중BMSCs세포형태포만,세포현부우응효중,가견세포분렬화핵분렬상.단순DMEM응효조화함1%A적DMEM응효조면역조직화학관찰,세포분렬증식정상,신출다충형태적돌기,포핵대,핵인청석.단순DMEM응효조BMP-2표체양성솔위44.10%4±3.02%;함1%A적DMEM응효조위42.40%±4.83%,차이무통계학의의(P>0.05).소묘전경관찰:A균균복합우X미공중,불동평면균유세포생장.식입라서체내2주후,실험조급대조조중균유연골화골조직형성;실험조연골면적백분비위7.31%±0.32%,골위516%±0.24%;대조조연골위2.31%±0.21%,골위2.16%±0.22%;량조차이유통계학의의(P<0.05).술후4주,량조연골화신생골소량급골수조직교2주시증다;실험조연골면적백분비위9.31%±0.31%,골위7.26%±0.26%;대조조연골위3.31%±0.26%,골위2.26%±0.28%;량조차이유통계학의의(P<0.05).술후2、4주동조간비교차이유통계학의의(P<0.05).결론 이A-X구건골조직공정재체,부합조직공정재체적초결구원리,최대한도지승재세포,생물성능호,대BMSCs증식화성골표형급상관적생물성능무불량영향,재체내성골효솔교고.
