中华老年多器官疾病杂志
中華老年多器官疾病雜誌
중화노년다기관질병잡지
CHINESE JOURNAL OF MULTIPLE ORGAN DISEASES IN THE ELDERLY
2008年
3期
215-219
,共5页
李圣青%李树钧%刘阿茹%赵峰%简文%遆新宇%欧阳海峰
李聖青%李樹鈞%劉阿茹%趙峰%簡文%遆新宇%歐暘海峰
리골청%리수균%류아여%조봉%간문%제신우%구양해봉
肺栓塞%肺动脉%平滑肌细胞%富半胱氨酸蛋白1%血小板源性生长因子%内皮素-1
肺栓塞%肺動脈%平滑肌細胞%富半胱氨痠蛋白1%血小闆源性生長因子%內皮素-1
폐전새%폐동맥%평활기세포%부반광안산단백1%혈소판원성생장인자%내피소-1
目的 研究大鼠急性肺栓塞模型肺组织中富半胱氨酸蛋白1(CRP1)的表达变化以及内皮素-1(ET-1)和血小板源性生长因子(PDGF)对肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)中CRP1表达的影响.方法 建立大鼠急性肺栓塞模型,分别在急性肺栓塞后1,8,24,48h开胸取出肺组织.常规提取肺组织的总RNA和总蛋白,以正常组为对照,采取半定量RT-PCR和Western blot方法研究CRP1在mRNA水平和蛋白水平的表达变化,采用免疫组织化学的方法检测大鼠肺组织中CRP1在肺栓塞前后表达的变化及其组织分布情况.分离培养PASMCs,在培养液中分别加入1μmol/L ET-1和10μg/L PDGF,分别采用半定量RT-PCR、Western blot和免疫荧光染色的方法研究不同时间点CRP1在PASMCs中的表达.采用Western blot方法研究SRF-CRP1-GATA6转录蛋白复合体中SRF和GATA6蛋白在不同时间点的表达.结果 在大鼠急性肺栓塞后的不同时间点,CRP1的mRNA水平和蛋白水平均逐渐升高,免疫组化研究表明CRP1主要分布在PASMCs,在急性肺栓塞后表达显著升高.PASMCs在ET-1和PDGF的作用下CRP1的表达随着时间的延长均显著升高.Western blot检测发现PASMCs内SRF和GATA6蛋白在不同时间点的表达均明显升高.结论 大鼠急性肺栓塞后肺组织内PASMCs的CRP1表达明显升高.离体实验表明ET-1和PDGF显著促进了PASMCs内CRP1的表达.CRP1可能通过SRF-CRP1-GATA6转录蛋白复合体参与PASMCs特异性基因表达的调控.
目的 研究大鼠急性肺栓塞模型肺組織中富半胱氨痠蛋白1(CRP1)的錶達變化以及內皮素-1(ET-1)和血小闆源性生長因子(PDGF)對肺動脈平滑肌細胞(PASMCs)中CRP1錶達的影響.方法 建立大鼠急性肺栓塞模型,分彆在急性肺栓塞後1,8,24,48h開胸取齣肺組織.常規提取肺組織的總RNA和總蛋白,以正常組為對照,採取半定量RT-PCR和Western blot方法研究CRP1在mRNA水平和蛋白水平的錶達變化,採用免疫組織化學的方法檢測大鼠肺組織中CRP1在肺栓塞前後錶達的變化及其組織分佈情況.分離培養PASMCs,在培養液中分彆加入1μmol/L ET-1和10μg/L PDGF,分彆採用半定量RT-PCR、Western blot和免疫熒光染色的方法研究不同時間點CRP1在PASMCs中的錶達.採用Western blot方法研究SRF-CRP1-GATA6轉錄蛋白複閤體中SRF和GATA6蛋白在不同時間點的錶達.結果 在大鼠急性肺栓塞後的不同時間點,CRP1的mRNA水平和蛋白水平均逐漸升高,免疫組化研究錶明CRP1主要分佈在PASMCs,在急性肺栓塞後錶達顯著升高.PASMCs在ET-1和PDGF的作用下CRP1的錶達隨著時間的延長均顯著升高.Western blot檢測髮現PASMCs內SRF和GATA6蛋白在不同時間點的錶達均明顯升高.結論 大鼠急性肺栓塞後肺組織內PASMCs的CRP1錶達明顯升高.離體實驗錶明ET-1和PDGF顯著促進瞭PASMCs內CRP1的錶達.CRP1可能通過SRF-CRP1-GATA6轉錄蛋白複閤體參與PASMCs特異性基因錶達的調控.
목적 연구대서급성폐전새모형폐조직중부반광안산단백1(CRP1)적표체변화이급내피소-1(ET-1)화혈소판원성생장인자(PDGF)대폐동맥평활기세포(PASMCs)중CRP1표체적영향.방법 건립대서급성폐전새모형,분별재급성폐전새후1,8,24,48h개흉취출폐조직.상규제취폐조직적총RNA화총단백,이정상조위대조,채취반정량RT-PCR화Western blot방법연구CRP1재mRNA수평화단백수평적표체변화,채용면역조직화학적방법검측대서폐조직중CRP1재폐전새전후표체적변화급기조직분포정황.분리배양PASMCs,재배양액중분별가입1μmol/L ET-1화10μg/L PDGF,분별채용반정량RT-PCR、Western blot화면역형광염색적방법연구불동시간점CRP1재PASMCs중적표체.채용Western blot방법연구SRF-CRP1-GATA6전록단백복합체중SRF화GATA6단백재불동시간점적표체.결과 재대서급성폐전새후적불동시간점,CRP1적mRNA수평화단백수평균축점승고,면역조화연구표명CRP1주요분포재PASMCs,재급성폐전새후표체현저승고.PASMCs재ET-1화PDGF적작용하CRP1적표체수착시간적연장균현저승고.Western blot검측발현PASMCs내SRF화GATA6단백재불동시간점적표체균명현승고.결론 대서급성폐전새후폐조직내PASMCs적CRP1표체명현승고.리체실험표명ET-1화PDGF현저촉진료PASMCs내CRP1적표체.CRP1가능통과SRF-CRP1-GATA6전록단백복합체삼여PASMCs특이성기인표체적조공.
