淡水渔业
淡水漁業
담수어업
FRESHWATER FISHERIES
2009年
2期
26-31
,共6页
孙军%梁卉%林小涛%胡云凤%童芳
孫軍%樑卉%林小濤%鬍雲鳳%童芳
손군%량훼%림소도%호운봉%동방
鲢(Hypophthalmichthys molitrix)%IL-8%克隆%组织表达%原核表达
鰱(Hypophthalmichthys molitrix)%IL-8%剋隆%組織錶達%原覈錶達
련(Hypophthalmichthys molitrix)%IL-8%극륭%조직표체%원핵표체
采用RACE-PCR 方法,从鲢(Hypophthalmichthys molitrix)头肾SMART cDNA中获得了679 bp IL-8 cDNA序列.结果显示:该序列包含169 bp 的5′非编码区,213 bp 3′端非编码区和297 bp 的开放阅读框;鲢IL-8的开放阅读框编码98个氨基酸残基,其中包含构成两对二硫键的4个保守半胱氨酸.RT-PCR结果显示鲢:IL-8 mRNA主要在胰、肝脏和头肾中表达.将鲢IL-8不含信号肽的成熟多肽克隆到原核融合表达载体pQE30上,转入大肠杆菌M15内进行表达,经SDS-PAGE电泳后显示,重组融合蛋白在分子量约11kD处有一明显表达带,与预期计算的分子量大小相一致.
採用RACE-PCR 方法,從鰱(Hypophthalmichthys molitrix)頭腎SMART cDNA中穫得瞭679 bp IL-8 cDNA序列.結果顯示:該序列包含169 bp 的5′非編碼區,213 bp 3′耑非編碼區和297 bp 的開放閱讀框;鰱IL-8的開放閱讀框編碼98箇氨基痠殘基,其中包含構成兩對二硫鍵的4箇保守半胱氨痠.RT-PCR結果顯示鰱:IL-8 mRNA主要在胰、肝髒和頭腎中錶達.將鰱IL-8不含信號肽的成熟多肽剋隆到原覈融閤錶達載體pQE30上,轉入大腸桿菌M15內進行錶達,經SDS-PAGE電泳後顯示,重組融閤蛋白在分子量約11kD處有一明顯錶達帶,與預期計算的分子量大小相一緻.
채용RACE-PCR 방법,종련(Hypophthalmichthys molitrix)두신SMART cDNA중획득료679 bp IL-8 cDNA서렬.결과현시:해서렬포함169 bp 적5′비편마구,213 bp 3′단비편마구화297 bp 적개방열독광;련IL-8적개방열독광편마98개안기산잔기,기중포함구성량대이류건적4개보수반광안산.RT-PCR결과현시련:IL-8 mRNA주요재이、간장화두신중표체.장련IL-8불함신호태적성숙다태극륭도원핵융합표체재체pQE30상,전입대장간균M15내진행표체,경SDS-PAGE전영후현시,중조융합단백재분자량약11kD처유일명현표체대,여예기계산적분자량대소상일치.
