林产化学与工业
林產化學與工業
림산화학여공업
CHEMISTRY AND INDUSTRY OF FOREST PRODUCTS
2011年
1期
35-40
,共6页
王剑锋%徐琼%肖志强%余奇峰%钱皇辉%熊飞飞
王劍鋒%徐瓊%肖誌彊%餘奇峰%錢皇輝%熊飛飛
왕검봉%서경%초지강%여기봉%전황휘%웅비비
β-葡萄糖苷酶%豆渣%对硝基苯-β-D吡喃葡萄糖苷%京尼平%黑曲霉
β-葡萄糖苷酶%豆渣%對硝基苯-β-D吡喃葡萄糖苷%京尼平%黑麯黴
β-포도당감매%두사%대초기분-β-D필남포도당감%경니평%흑곡매
利用单因素、正交试验考察了黑曲霉L菌株发酵豆渣产β-葡萄糖苷酶的条件和酶解京尼平苷的特性.结果表明:2%豆渣适宜作为实验菌株液体发酵产酶培养基,当培养基中接种孢子浓度大于每毫升2 x 105个时,菌株产酶受发酵温度、装液量的影响显著,而不受接种量、摇床转速的影响,培养基初始pH值1.5时,菌株仍能正常产酶;优化的产酶培养基组成为豆渣1%、米糠1%和Tween 80 0.1%,初始pH值5.5;菌株在发酵温度28℃、装液量50 mL(250 mL摇瓶)、摇床转速150 r/min的发酵条件下发酵120 h,发酵液酶活为(200±10)U/mL.所产β-葡萄糖苷酶水解京尼平苷的最适温度为55℃、最适pH值2.5、最佳水解时间15 min;在该条件下酶的表观米氏常数(Km)为1.35 g/L,最大水解速率(Vmax)为26.45 g/(L·min·mg),酶活半衰期为15 min,50℃时大于60 min;酶的水解活性受Na+、Ca2+的显著激活,受Mg2+、Ba2+、Cu2+、Fe2+、Hg+、Zn2+Mn2+等离子(10mmol/L)和葡萄糖、乙醇的抑制.
利用單因素、正交試驗攷察瞭黑麯黴L菌株髮酵豆渣產β-葡萄糖苷酶的條件和酶解京尼平苷的特性.結果錶明:2%豆渣適宜作為實驗菌株液體髮酵產酶培養基,噹培養基中接種孢子濃度大于每毫升2 x 105箇時,菌株產酶受髮酵溫度、裝液量的影響顯著,而不受接種量、搖床轉速的影響,培養基初始pH值1.5時,菌株仍能正常產酶;優化的產酶培養基組成為豆渣1%、米糠1%和Tween 80 0.1%,初始pH值5.5;菌株在髮酵溫度28℃、裝液量50 mL(250 mL搖瓶)、搖床轉速150 r/min的髮酵條件下髮酵120 h,髮酵液酶活為(200±10)U/mL.所產β-葡萄糖苷酶水解京尼平苷的最適溫度為55℃、最適pH值2.5、最佳水解時間15 min;在該條件下酶的錶觀米氏常數(Km)為1.35 g/L,最大水解速率(Vmax)為26.45 g/(L·min·mg),酶活半衰期為15 min,50℃時大于60 min;酶的水解活性受Na+、Ca2+的顯著激活,受Mg2+、Ba2+、Cu2+、Fe2+、Hg+、Zn2+Mn2+等離子(10mmol/L)和葡萄糖、乙醇的抑製.
이용단인소、정교시험고찰료흑곡매L균주발효두사산β-포도당감매적조건화매해경니평감적특성.결과표명:2%두사괄의작위실험균주액체발효산매배양기,당배양기중접충포자농도대우매호승2 x 105개시,균주산매수발효온도、장액량적영향현저,이불수접충량、요상전속적영향,배양기초시pH치1.5시,균주잉능정상산매;우화적산매배양기조성위두사1%、미강1%화Tween 80 0.1%,초시pH치5.5;균주재발효온도28℃、장액량50 mL(250 mL요병)、요상전속150 r/min적발효조건하발효120 h,발효액매활위(200±10)U/mL.소산β-포도당감매수해경니평감적최괄온도위55℃、최괄pH치2.5、최가수해시간15 min;재해조건하매적표관미씨상수(Km)위1.35 g/L,최대수해속솔(Vmax)위26.45 g/(L·min·mg),매활반쇠기위15 min,50℃시대우60 min;매적수해활성수Na+、Ca2+적현저격활,수Mg2+、Ba2+、Cu2+、Fe2+、Hg+、Zn2+Mn2+등리자(10mmol/L)화포도당、을순적억제.