中国生物工程杂志
中國生物工程雜誌
중국생물공정잡지
JOURNAL OF CHINESE BIOTECHNOLOGY
2005年
8期
39-44
,共6页
孟葆林%李维琪%毛建平%曹旭
孟葆林%李維琪%毛建平%曹旭
맹보림%리유기%모건평%조욱
载脂蛋白A-I%apoA-I启动子%增强型绿色荧光蛋白%人肝癌细胞HepG2%稳定转染克隆
載脂蛋白A-I%apoA-I啟動子%增彊型綠色熒光蛋白%人肝癌細胞HepG2%穩定轉染剋隆
재지단백A-I%apoA-I계동자%증강형록색형광단백%인간암세포HepG2%은정전염극륭
分别从pMD18-T质粒和人基因组DNA扩增出人apoA-I CDS区序列和apoA-I启动子(702bp片段),与pEGFP-N1重组,构成受apoA-I启动子调控的pEGFP-N1质粒和融合蛋白表达质粒,分别转染人肝癌HepG2细胞,以绿色荧光为标志筛选稳定转染系列克隆.用RT-PCR、荧光显微镜、免疫荧光术等鉴定其中一个克隆融合蛋白的表达;分别以胰岛素和葡萄糖刺激物鉴定该克隆的外源apoA-I启动子调控.结果表明:人apoA-I分泌型表达调控肝细胞模型初步建成.
分彆從pMD18-T質粒和人基因組DNA擴增齣人apoA-I CDS區序列和apoA-I啟動子(702bp片段),與pEGFP-N1重組,構成受apoA-I啟動子調控的pEGFP-N1質粒和融閤蛋白錶達質粒,分彆轉染人肝癌HepG2細胞,以綠色熒光為標誌篩選穩定轉染繫列剋隆.用RT-PCR、熒光顯微鏡、免疫熒光術等鑒定其中一箇剋隆融閤蛋白的錶達;分彆以胰島素和葡萄糖刺激物鑒定該剋隆的外源apoA-I啟動子調控.結果錶明:人apoA-I分泌型錶達調控肝細胞模型初步建成.
분별종pMD18-T질립화인기인조DNA확증출인apoA-I CDS구서렬화apoA-I계동자(702bp편단),여pEGFP-N1중조,구성수apoA-I계동자조공적pEGFP-N1질립화융합단백표체질립,분별전염인간암HepG2세포,이록색형광위표지사선은정전염계렬극륭.용RT-PCR、형광현미경、면역형광술등감정기중일개극륭융합단백적표체;분별이이도소화포도당자격물감정해극륭적외원apoA-I계동자조공.결과표명:인apoA-I분비형표체조공간세포모형초보건성.
