中国血吸虫病防治杂志
中國血吸蟲病防治雜誌
중국혈흡충병방치잡지
CHINESE JOURNAL OF SCHISTOSOMIASIS CONTROL
2006年
2期
83-87
,共5页
吴栋才%刘湘%何立%蒋明森%杨孟祥%易新元
吳棟纔%劉湘%何立%蔣明森%楊孟祥%易新元
오동재%류상%하립%장명삼%양맹상%역신원
日本血吸虫%早期诊断%可溶性成虫抗原%可溶性童虫抗原%表位
日本血吸蟲%早期診斷%可溶性成蟲抗原%可溶性童蟲抗原%錶位
일본혈흡충%조기진단%가용성성충항원%가용성동충항원%표위
目的筛选日本血吸虫童虫早期诊断抗原及其表位.方法制备日本血吸虫可溶性童虫抗原(SSA),经十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)及Western blot后分别与日本血吸虫感染后10、21、42天兔血清进行酶联免疫印迹试验(EITB),筛选出能被早期感染血清所识别的抗原组分.用日本血吸虫感染后21天血清从噬菌体12随机肽库中筛选、富集、纯化、扩增与早期感染兔血清有高亲和力的噬菌体克隆,经动物实验初步评估其对日本血吸虫感染的早期诊断效果.结果SDS-PAGE显示SSA的总条带数多于可溶性成虫抗原(SAWA),但大多为共同抗原.EITB结果显示SSA共出现12条早期反应抗原带,其中97 kDa和47 kDa抗原分子只能被感染后10天兔血清特异性识别;SAWA仅出现7条反应带,未显示只能被感染后10天兔血清识别的期特异性抗原分子.挑选出3个与感染后21天兔血清具有高亲和力的单克隆噬菌体,混合后分别用于检测感染日本血吸虫10、21 d鼠血清中IgG特异性抗体,阳性检出率分别为48.8%和64.4%.结论SSA中的97 kDa和44 kDa抗原分子及3个噬菌体随机12肽抗原模拟表位可能具有日本血吸虫感染早期诊断价值.
目的篩選日本血吸蟲童蟲早期診斷抗原及其錶位.方法製備日本血吸蟲可溶性童蟲抗原(SSA),經十二烷基磺痠鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)及Western blot後分彆與日本血吸蟲感染後10、21、42天兔血清進行酶聯免疫印跡試驗(EITB),篩選齣能被早期感染血清所識彆的抗原組分.用日本血吸蟲感染後21天血清從噬菌體12隨機肽庫中篩選、富集、純化、擴增與早期感染兔血清有高親和力的噬菌體剋隆,經動物實驗初步評估其對日本血吸蟲感染的早期診斷效果.結果SDS-PAGE顯示SSA的總條帶數多于可溶性成蟲抗原(SAWA),但大多為共同抗原.EITB結果顯示SSA共齣現12條早期反應抗原帶,其中97 kDa和47 kDa抗原分子隻能被感染後10天兔血清特異性識彆;SAWA僅齣現7條反應帶,未顯示隻能被感染後10天兔血清識彆的期特異性抗原分子.挑選齣3箇與感染後21天兔血清具有高親和力的單剋隆噬菌體,混閤後分彆用于檢測感染日本血吸蟲10、21 d鼠血清中IgG特異性抗體,暘性檢齣率分彆為48.8%和64.4%.結論SSA中的97 kDa和44 kDa抗原分子及3箇噬菌體隨機12肽抗原模擬錶位可能具有日本血吸蟲感染早期診斷價值.
목적사선일본혈흡충동충조기진단항원급기표위.방법제비일본혈흡충가용성동충항원(SSA),경십이완기광산납-취병희선알응효전영(SDS-PAGE)급Western blot후분별여일본혈흡충감염후10、21、42천토혈청진행매련면역인적시험(EITB),사선출능피조기감염혈청소식별적항원조분.용일본혈흡충감염후21천혈청종서균체12수궤태고중사선、부집、순화、확증여조기감염토혈청유고친화력적서균체극륭,경동물실험초보평고기대일본혈흡충감염적조기진단효과.결과SDS-PAGE현시SSA적총조대수다우가용성성충항원(SAWA),단대다위공동항원.EITB결과현시SSA공출현12조조기반응항원대,기중97 kDa화47 kDa항원분자지능피감염후10천토혈청특이성식별;SAWA부출현7조반응대,미현시지능피감염후10천토혈청식별적기특이성항원분자.도선출3개여감염후21천토혈청구유고친화력적단극륭서균체,혼합후분별용우검측감염일본혈흡충10、21 d서혈청중IgG특이성항체,양성검출솔분별위48.8%화64.4%.결론SSA중적97 kDa화44 kDa항원분자급3개서균체수궤12태항원모의표위가능구유일본혈흡충감염조기진단개치.