CAJ | 학술논문

目的:观察周期性机械牵张应力对人骨髓间充质干细胞的增殖活性与细胞周期的影响.方法:实验于2006-02/06在同济医院矫形外科实验室完成.①建立体外细胞周期性机械牵张力学装置,并利用三维有限元的方法分析基膜的力学分布.②使用密度梯度离心法分离人骨髓间充质干细胞.③取第3～6代细胞接种于弹性硅胶膜培养板,分组:实验组细胞接受力学装置1.0 Hz的频率,不同大小的应力(3%,6%,9%,12%,18%)、不同时间(12,24,36,48,60,72 h)的机械信号刺激,对照组细胞不受力学信号刺激,其他培养条件与实验组一致.④细胞行力学干预后,用相差显微镜观察行细胞形态、排列,分别用细胞计数法、四甲基偶氮唑和流式细胞仪测量细胞增殖和细胞周期.结果:①自行建立的力学装置性能稳定,细胞接种硅胶6孔板后12～24 h贴壁,贴壁良好,24 h后细胞覆盖率约达70%,无细菌污染现象,可以用于应力刺激体外细胞效应的实验研究.②应力干预人骨髓间充质干细胞12 h后,细胞形态稍变细长,轮廓鲜明,并沿受力环切线方向规则排列,干预24 h变化更明显.③通过细胞计数、四甲基偶氮唑、流式细胞周期检测,发现适当大小的力学刺激对人骨髓间充质干细胞具促细胞增殖作用,增殖指数增大,其中12%的应力作用最明显,其增殖指数约为对照组的1.86倍;过强的机械应力(18%)对细胞不具有促增殖效应,并可能存在毒性作用;早期力学干预可以促进细胞增殖,干预时间过长(48 h以后)反而表现为抑制生长趋势.结论:适当的周期性牵张应力可以提高人骨髓间充质干细胞的增殖能力.
목적:관찰주기성궤계견장응력대인골수간충질간세포적증식활성여세포주기적영향.방법:실험우2006-02/06재동제의원교형외과실험실완성.①건입체외세포주기성궤계견장역학장치,병이용삼유유한원적방법분석기막적역학분포.②사용밀도제도리심법분리인골수간충질간세포.③취제3～6대세포접충우탄성규효막배양판,분조:실험조세포접수역학장치1.0 Hz적빈솔,불동대소적응력(3%,6%,9%,12%,18%)、불동시간(12,24,36,48,60,72 h)적궤계신호자격,대조조세포불수역학신호자격,기타배양조건여실험조일치.④세포행역학간예후,용상차현미경관찰행세포형태、배렬,분별용세포계수법、사갑기우담서화류식세포의측량세포증식화세포주기.결과:①자행건립적역학장치성능은정,세포접충규효6공판후12～24 h첩벽,첩벽량호,24 h후세포복개솔약체70%,무세균오염현상,가이용우응력자격체외세포효응적실험연구.②응력간예인골수간충질간세포12 h후,세포형태초변세장,륜곽선명,병연수력배절선방향규칙배렬,간예24 h변화경명현.③통과세포계수、사갑기우담서、류식세포주기검측,발현괄당대소적역학자격대인골수간충질간세포구촉세포증식작용,증식지수증대,기중12%적응력작용최명현,기증식지수약위대조조적1.86배;과강적궤계응력(18%)대세포불구유촉증식효응,병가능존재독성작용;조기역학간예가이촉진세포증식,간예시간과장(48 h이후)반이표현위억제생장추세.결론:괄당적주기성견장응력가이제고인골수간충질간세포적증식능력.