狂犬病病毒重组免疫毒素的表达及其生物活性鉴定
광견병병독중조면역독소적표체급기생물활성감정
Expression of a Recombinant Immunotoxin against Rabies Virus-infected Cells and Its Biological Activity
  • 万方数据
    中国生物工程杂志 중국생물공정잡지
    JOURNAL OF CHINESE BIOTECHNOLOGY
    2008年 5期 1-5 ,共5页

    王化磊%王承宇%杨松涛%冯娜%郑学星%李群%苏建青%朱平%夏咸柱

    왕화뢰%왕승우%양송도%풍나%정학성%리군%소건청%주평%하함주

    重组免疫毒素%狂犬病病毒糖蛋白%表达%细胞毒作用 重組免疫毒素%狂犬病病毒糖蛋白%錶達%細胞毒作用
    중조면역독소%광견병병독당단백%표체%세포독작용
    将狂犬病病毒中和性单链抗体基因克隆入原核表达载体pET-PE40,经酶切鉴定及序列测定,成功构建了重组免疫毒素原核表达载体.IPTG诱导后目的蛋白获得高效表达, SDS-PAGE分析目的蛋白主要以不溶性包涵体的形式存在于菌体中,表达量占菌体总蛋白的 32.29%.包涵体蛋白经体外复性及离子交换色谱柱、疏水作用色谱柱、Sephadex G200凝胶过滤层析柱三步纯化后获得纯度大于96%的目的蛋白,间接免疫荧光染色检测表明重组免疫毒素与狂犬病病毒感染细胞具有抗原结合活性,MTT试验显示,重组免疫毒素对狂犬病病毒感染细胞具有明显的杀伤作用,而对正常细胞无杀伤作用.
    장광견병병독중화성단련항체기인극륭입원핵표체재체pET-PE40,경매절감정급서렬측정,성공구건료중조면역독소원핵표체재체.IPTG유도후목적단백획득고효표체, SDS-PAGE분석목적단백주요이불용성포함체적형식존재우균체중,표체량점균체총단백적 32.29%.포함체단백경체외복성급리자교환색보주、소수작용색보주、Sephadex G200응효과려층석주삼보순화후획득순도대우96%적목적단백,간접면역형광염색검측표명중조면역독소여광견병병독감염세포구유항원결합활성,MTT시험현시,중조면역독소대광견병병독감염세포구유명현적살상작용,이대정상세포무살상작용.
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